某科研小組將抗干旱基因OSR導(dǎo)入小麥,培育出抗干旱小麥新品種,其操作流程及可能用到的限制酶如圖所示,其中Tet′為四環(huán)素抗性基因,Amp′為氨芐青霉素抗性基因,①~⑥表示操作過程。請回答問題。
限制酶 |
BclⅠ |
EcoRⅠ |
XbaⅠ |
Sau3AⅠ |
BamHⅠ |
識別序列及切割位點 |
T↓GATCA |
G↓AATTC |
T↓CTAGA |
↓GATC |
G↓GATCC |
(1)過程①的原理是
逆轉(zhuǎn)錄和DNA半保留復(fù)制
逆轉(zhuǎn)錄和DNA半保留復(fù)制
,該過程添加引物的作用是
使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸
使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸
,引物有
3
3
種。
(2)過程②構(gòu)建的基因表達載體中與RNA聚合酶結(jié)合的結(jié)構(gòu)是
啟動子
啟動子
,該過程不能用Sau3AⅠ切割OSR和Ti質(zhì)粒的原因是
Sau3AⅠ的識別序列包含在BamHⅠ的識別序列中,會切割復(fù)制原點
Sau3AⅠ的識別序列包含在BamHⅠ的識別序列中,會切割復(fù)制原點
。
(3)過程③常用
Ca2+
Ca2+
處理根瘤農(nóng)桿菌,使之處于
一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子
一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子
的生理狀態(tài)。過程④的實現(xiàn)依賴于農(nóng)桿菌中的
Ti質(zhì)粒上的T-DNA
Ti質(zhì)粒上的T-DNA
。
(4)過程⑥,若要從個體生物學(xué)水平鑒定抗干旱小麥植株是否具有抗干旱的特性,應(yīng)進行的操作是
將抗干旱小麥植株種植在干旱的環(huán)境中
將抗干旱小麥植株種植在干旱的環(huán)境中
。