25.某科研小組將抗干旱基因OSR導入小麥,培育出抗干旱小麥新品種,其操作流程及可能用到的限制酶如圖所示,其中Tet′為四環(huán)素抗性基因,Amp′為氨芐青霉素抗性基因,①~⑥表示操作過程。請回答問題。
限制酶 |
BclⅠ |
EcoRⅠ |
XbaⅠ |
Sau3AⅠ |
BamHⅠ |
識別序列及切割位點 |
T↓GATCA |
G↓AATTC |
T↓CTAGA |
↓GATC |
G↓GATCC |
(1)過程①的原理是
,該過程添加引物的作用是
,引物有
種。
(2)過程②構建的基因表達載體中與RNA聚合酶結合的結構是
,該過程不能用Sau3AⅠ切割OSR和Ti質粒的原因是
。
(3)過程③常用
處理根瘤農桿菌,使之處于
的生理狀態(tài)。過程④的實現依賴于農桿菌中的
。
(4)過程⑥,若要從個體生物學水平鑒定抗干旱小麥植株是否具有抗干旱的特性,應進行的操作是
。