通過(guò)基因工程技術(shù)能大量生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素。圖1所示為人工構(gòu)建的大腸桿菌質(zhì)粒pBR322,是由三種質(zhì)粒經(jīng)復(fù)雜重組過(guò)程而構(gòu)建。其上含氨芐青霉素抗性基因(Amp
r )、四環(huán)素抗性基因(Tet
t)。圖2為相關(guān)限制酶的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)人工構(gòu)建pBR322質(zhì)粒需要的酶有
限制酶、DNA連接酶
限制酶、DNA連接酶
。
(2)生產(chǎn)生長(zhǎng)激素需從人垂體細(xì)胞中提取mRNA,逆轉(zhuǎn)錄得到DNA,以該DNA為
模板
模板
進(jìn)行大量復(fù)制,獲得 相應(yīng)的目的基因。
(3)為了構(gòu)建重組質(zhì)粒,采用Pst I、EcoR I處理目的基因和質(zhì)粒,與只用Pst I處理相比,這樣操作的優(yōu)勢(shì)是:
用PstⅠ、EcoRⅠ處理目的基因和質(zhì)粒,因形成的黏性末端不同可避免目的基因—目的基因(環(huán)化)、質(zhì)粒—質(zhì)粒(環(huán)化)等錯(cuò)誤連接形式(避免產(chǎn)生錯(cuò)誤連接方式即給分)
用PstⅠ、EcoRⅠ處理目的基因和質(zhì)粒,因形成的黏性末端不同可避免目的基因—目的基因(環(huán)化)、質(zhì)?!|(zhì)粒(環(huán)化)等錯(cuò)誤連接形式(避免產(chǎn)生錯(cuò)誤連接方式即給分)
。將構(gòu)建的重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌后,為了排除普通大腸桿菌(無(wú)pBR322質(zhì)粒)、空質(zhì)粒大腸桿菌(含pBR322質(zhì)粒但沒(méi)有目的基因)的干擾,進(jìn)行了進(jìn)一步檢測(cè)。配制甲、乙兩種培養(yǎng)基,甲培養(yǎng)基含四環(huán)素,乙培養(yǎng)基含四環(huán)素和氨芐青霉素。含目的基因的大腸桿菌在甲培養(yǎng)基上
能
能
(填“能”或“不能”)生存,在乙培養(yǎng)基上
不能
不能
(填“能”或“不能”)生存。
(4)導(dǎo)入受體細(xì)胞后,常用
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
技術(shù)檢測(cè)生長(zhǎng)激素 在大腸桿菌中是否成功表達(dá)。
(5)基因工程的應(yīng)用十分廣闊,可用轉(zhuǎn)基因牛制作乳腺生物反應(yīng)器,從乳汁中提取藥物,則該操作過(guò)程中選擇的受體細(xì)胞是
牛的受精卵
牛的受精卵
,原因是
動(dòng)物受精卵具有全能性(動(dòng)物不能像植物那樣,利用一個(gè)除受精卵以外的獨(dú)立的體細(xì)胞直接培養(yǎng)成完整的個(gè)體)
動(dòng)物受精卵具有全能性(動(dòng)物不能像植物那樣,利用一個(gè)除受精卵以外的獨(dú)立的體細(xì)胞直接培養(yǎng)成完整的個(gè)體)
。