擬南芥的耐寒性與AtCOR15a基因受低溫誘導(dǎo)后表達(dá)的AtCOR15a蛋白相關(guān)。研究人員將該基因作為目的基因培育抗凍的番茄新品種。圖1、圖2分別為構(gòu)建的能夠表達(dá)AtCOR15a的表達(dá)載體及培育流程示意圖,請回答下列問題:
(1)要想短時間內(nèi)獲得大量的AtCOR15a基因所采用的技術(shù)為
PCR
PCR
,該技術(shù)構(gòu)建的反應(yīng)體系中應(yīng)加入
AtCOR15a基因(模板DNA)、dNTP、引物、Taq酶、緩沖液
AtCOR15a基因(模板DNA)、dNTP、引物、Taq酶、緩沖液
??赏ㄟ^PCR技術(shù)在所有DNA分子中專一性擴(kuò)增出AtCOR15a基因,其原因是
引物是根據(jù)目的基因的一段已知序列設(shè)計合成的
引物是根據(jù)目的基因的一段已知序列設(shè)計合成的
。
(2)位于AtCOR15a基因上游的RD29A是誘導(dǎo)型啟動子,根據(jù)題干信息推測其在轉(zhuǎn)基因植物中的作用是
使目的基因在低溫條件的誘導(dǎo)下開始轉(zhuǎn)錄
使目的基因在低溫條件的誘導(dǎo)下開始轉(zhuǎn)錄
,表達(dá)載體中nptⅡ基因賦予受體細(xì)胞抗卡那霉素的能力,其作用是
鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來
鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來
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(3)表達(dá)載體構(gòu)建時,AtCOR15a基因和nptⅡ基因應(yīng)整合在Ti質(zhì)粒的T-DNA內(nèi)部,是因為
Ti質(zhì)粒僅使T-DNA片段可以進(jìn)入番茄細(xì)胞并整合到植物細(xì)胞染色體的DNA中
Ti質(zhì)粒僅使T-DNA片段可以進(jìn)入番茄細(xì)胞并整合到植物細(xì)胞染色體的DNA中
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(4)圖2中擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)基類型為
液體
液體
(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基,③④過程的培養(yǎng)條件是不同的,請列舉兩點
兩培養(yǎng)基的植物激素比例不同、對光照的需求條件也不同
兩培養(yǎng)基的植物激素比例不同、對光照的需求條件也不同
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