人的血清白蛋白(HSA)在臨床上需求量很大,通常從人血中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人類(lèi)感染性病原體造成的威脅與日俱增,使人們對(duì)血液制品顧慮重重。圖一是以基因工程技術(shù)獲取HSA的兩條途徑,其中報(bào)告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無(wú)色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。圖二為HSA基因兩側(cè)的核苷酸序列。圖三為相關(guān)限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)。據(jù)圖回答下列問(wèn)題:
(1)基因工程的核心步驟是
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
,完成過(guò)程②所需要技術(shù)手段是
植物組織培養(yǎng)
植物組織培養(yǎng)
。
(2)采用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因,根據(jù)其兩端序列,則需要選擇的一對(duì)引物序列是
A C
A C
。
A.引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′,引物Ⅱ是5′-GTAAGTTAAGAG-3′
B.引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′,引物Ⅱ是5′-CATTCAATTCTC-3′
C.引物Ⅰ是5′-GAAGGATCCATT-3′,引物Ⅱ是5′-GTAAGTTAAGAG-3′
D.引物Ⅰ是5′-GAAGGATCCATT-3′,引物Ⅱ是5′-GAGAATTGAATG-3′
(3)依據(jù)圖一、圖二和圖三分析,下列敘述錯(cuò)誤的是
C
C
。
A.應(yīng)該使用酶B和酶C獲取HSA基因
B.應(yīng)該使用酶A和酶B切割Ti質(zhì)粒
C.成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒含1個(gè)酶A的識(shí)別位點(diǎn)
D.成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒用酶C處理將得到2個(gè)DNA片段
(4)圖一過(guò)程①中需將植物細(xì)胞與
農(nóng)桿菌
農(nóng)桿菌
混合后共同培養(yǎng),旨在讓
T-DNA
T-DNA
整合到植物細(xì)胞染色體DNA上;除盡農(nóng)桿菌后,還須轉(zhuǎn)接到含
物質(zhì)K
物質(zhì)K
的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。
(5)過(guò)程④前對(duì)卵細(xì)胞供體母牛進(jìn)行
超數(shù)排卵
超數(shù)排卵
處理。過(guò)程通常將受精卵培養(yǎng)至
桑葚胚或囊胚
桑葚胚或囊胚
階段。過(guò)程⑤鑒定胚胎性別時(shí)常取
滋養(yǎng)層
滋養(yǎng)層
細(xì)胞做DNA分析。
(6)為檢測(cè)HSA基因的表達(dá)情況,可提取受體細(xì)胞的
蛋白質(zhì)
蛋白質(zhì)
,用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。