潘老師帶領(lǐng)同學在暑假以“血紅蛋白的提取和分離”為課題,進行了科學實踐活動。分析并回答下列問題:
(1)提取血紅蛋白的實驗材料,選 豬血豬血(填“豬血”或“雞血”),因為 哺乳動物成熟紅細胞中沒有細胞核和各種細胞器哺乳動物成熟紅細胞中沒有細胞核和各種細胞器。
(2)為了防止血液凝固,在采血容器中要預先加入 抗凝劑抗凝劑。
(3)樣品處理中紅細胞要 生理鹽水生理鹽水洗滌,并采用低速短時間離心,如此反復三次,直至 上清液不再呈現(xiàn)黃色上清液不再呈現(xiàn)黃色,表明紅細胞已經(jīng)洗滌干凈。
(4)將洗滌干凈的紅細胞置于燒杯中,加入 蒸餾水蒸餾水和 甲苯甲苯使紅細胞破裂,釋放出血紅蛋白。
(5)通過粗分離獲得血紅蛋白混合液后,可以用凝膠色譜法進一步純化,此方法能分離蛋白質(zhì),根據(jù)的是 相對分子質(zhì)量的大小相對分子質(zhì)量的大小。
(6)操作時要注意色譜柱的裝填不得有氣泡。氣泡會 攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序降低分離效果。
(7)某研究人員采用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳對4種不同方法提取出的某蛋白進行分離的結(jié)果如圖所示。
①SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)的原理是 SDS所帶負電荷大大超過了蛋白質(zhì)原有的電荷量SDS所帶負電荷大大超過了蛋白質(zhì)原有的電荷量,因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間電荷差別,使電泳的遷移率完全取決于 分子的大小分子的大小。
②圖中Marker(標樣)所起的作用是 對照對照,不同的條帶和條帶的深淺分別代表 不同的蛋白質(zhì)和含量的多少不同的蛋白質(zhì)和含量的多少。
③據(jù)圖分析,你認為最佳提取方法是 22號,因為 據(jù)圖可知,對應的條帶最多且顏色最深,說明該提取方法獲得的蛋白質(zhì)種類和含量最多據(jù)圖可知,對應的條帶最多且顏色最深,說明該提取方法獲得的蛋白質(zhì)種類和含量最多。
【答案】豬血;哺乳動物成熟紅細胞中沒有細胞核和各種細胞器;抗凝劑;生理鹽水;上清液不再呈現(xiàn)黃色;蒸餾水;甲苯;相對分子質(zhì)量的大??;攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序;SDS所帶負電荷大大超過了蛋白質(zhì)原有的電荷量;分子的大??;對照;不同的蛋白質(zhì)和含量的多少;2;據(jù)圖可知,對應的條帶最多且顏色最深,說明該提取方法獲得的蛋白質(zhì)種類和含量最多
【解答】
【點評】
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