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圖1為生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時使用的質(zhì)粒，圖2為生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時所用的目的基因及部分限制酶的酶切位點。
（1）為了高效地構(gòu)建基因表達載體，最好選用
HindⅢ和BamHⅠ
HindⅢ和BamHⅠ
（填限制酶名稱）同時酶切質(zhì)粒和目的基因。
（2）為了篩選出基因表達載體，需要將DNA連接酶處理后的溶液與大腸桿菌混合在一起進行培養(yǎng)。為了促使大腸桿菌吸收外源DNA，需要用
CaCl2或（Ca2+）
CaCl2或（Ca2+）
處理大腸桿菌使其處于感受態(tài)。隨后再將大腸桿菌涂布在含有
氨苯青霉素
氨苯青霉素
的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一般情況下這樣培養(yǎng)出來的大腸桿菌有兩種類型：一種是含有結(jié)合了目的基因的質(zhì)粒，另一種是含有未結(jié)合目的基因的質(zhì)粒。將大腸桿菌中的質(zhì)粒取出進一步鑒定，可以加入
HindⅢ和BamHⅠ
HindⅢ和BamHⅠ
（填限制酶名稱）酶切質(zhì)粒，其中含有目的基因的質(zhì)粒酶切后可以產(chǎn)生目的基因，這可以通過電泳分析進行判斷。
（3）圖示質(zhì)粒中的T-DNA與Ti質(zhì)粒中的T-DNA作用類似，其作用是
將T-DNA之間的DNA序列轉(zhuǎn)移并整合至受體細胞的染色體DNA上
將T-DNA之間的DNA序列轉(zhuǎn)移并整合至受體細胞的染色體DNA上
。
（4）有人擔(dān)心基因工程中使用的抗性基因可通過雜交轉(zhuǎn)移至近緣物種中，本例中的質(zhì)粒
能
能
（填“能”或“不能“）降低這種風(fēng)險，原因是
只有T-DNA之間的DNA序列可以轉(zhuǎn)移至染色體DNA上，本例中抗性基因不能轉(zhuǎn)移到染色體DNA上，而位于細胞質(zhì)中的基因難以穩(wěn)定保存和復(fù)制，因此在受體細胞發(fā)育為個體的過程中，細胞質(zhì)中的抗性基因會丟失，而不會通過雜交轉(zhuǎn)移至近緣物種中
只有T-DNA之間的DNA序列可以轉(zhuǎn)移至染色體DNA上，本例中抗性基因不能轉(zhuǎn)移到染色體DNA上，而位于細胞質(zhì)中的基因難以穩(wěn)定保存和復(fù)制，因此在受體細胞發(fā)育為個體的過程中，細胞質(zhì)中的抗性基因會丟失，而不會通過雜交轉(zhuǎn)移至近緣物種中
。

【答案】HindⅢ和BamHⅠ；CaCl2或（Ca2+）；氨苯青霉素；HindⅢ和BamHⅠ；將T-DNA之間的DNA序列轉(zhuǎn)移并整合至受體細胞的染色體DNA上；能；只有T-DNA之間的DNA序列可以轉(zhuǎn)移至染色體DNA上，本例中抗性基因不能轉(zhuǎn)移到染色體DNA上，而位于細胞質(zhì)中的基因難以穩(wěn)定保存和復(fù)制，因此在受體細胞發(fā)育為個體的過程中，細胞質(zhì)中的抗性基因會丟失，而不會通過雜交轉(zhuǎn)移至近緣物種中
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：8引用：1難度：0.7
相似題

  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　　）
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    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)模化生產(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    （1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)模化生產(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復(fù)制
    B．規(guī)定擴增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當(dāng)復(fù)制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應(yīng)中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　　）

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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