苯丙酮尿癥是一種單基因遺傳病，由于PKU某因突變導(dǎo)致患者尿液中含有大量苯丙酮酸?；蚨c(diǎn)整合可替換特定某因用于該病治療，即將正常PKU基因定點(diǎn)整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細(xì)胞的染色體DNA上，替換突變基因。簡要過程如下圖所示。請回答下列問題：
注：圖中neoR為新霉素抗性基因，HB1和HB2為小鼠胚胎干細(xì)胞染色體DNA上突變的PKU基因兩側(cè)的一段DNA序列。

（1）構(gòu)建重組載體時，需要根據(jù)

HB1和HB2的堿基

HB1和HB2的堿基

序列分別合成HB1'和HB2'，在二者之間除了插入正常的PKU基因和neoR基因以外，還必須含有

啟動于、終止子

啟動于、終止子

。此過程常用的工具酶有

限制酶、DNA連接酶

限制酶、DNA連接酶

，neoR基因的作用是

鑒定與篩選含有正常PKU基因的胚胎干細(xì)胞

鑒定與篩選含有正常PKU基因的胚胎干細(xì)胞

。
（2）可用

顯微注射

顯微注射

技術(shù)將重組載體導(dǎo)入小鼠胚胎干細(xì)胞，誘導(dǎo)相應(yīng)區(qū)域互換，完成胚胎干細(xì)胞的基因改造。胚胎干細(xì)胞的特點(diǎn)有

能大量增殖；具有發(fā)育的全能性；體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯；在體外培養(yǎng)條件下，可以增殖而不發(fā)生分

能大量增殖；具有發(fā)育的全能性；體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯；在體外培養(yǎng)條件下，可以增殖而不發(fā)生分

（答出兩點(diǎn)即可）。
（3）現(xiàn)用完成基因改造后的胚胎干細(xì)胞進(jìn)行個體生物學(xué)水平鑒定，寫出鑒定思路、結(jié)果及結(jié)論：

將該胚胎干細(xì)胞培育成小鼠，檢測小鼠尿液中苯丙酮酸含量，若小鼠尿液中不含大量苯丙酮酸，說明PKU基因成功表達(dá)，基因治療成功，反之，則不成功

將該胚胎干細(xì)胞培育成小鼠，檢測小鼠尿液中苯丙酮酸含量，若小鼠尿液中不含大量苯丙酮酸，說明PKU基因成功表達(dá)，基因治療成功，反之，則不成功

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