已知組成型啟動子可以高效地啟動目的基因在植物各種組織中的表達，但常會阻礙植物的生長發(fā)育。誘導型啟動子可在特定環(huán)境條件下誘導目的基因的表達。沙冬青脫水素基因（AmDHN基因）能使植株具有較強的抗旱作用?？蒲腥藛T通過構建AmDHN基因表達載體，以培育耐旱苜蓿新品種，所用載體如圖1所示，請回答下列問題：

（1）用載體1構建含AmDHN目的基因的表達載體，可以成功轉化苜蓿，但會出現(xiàn)抑制抗性芽生長和抗性植株生根的現(xiàn)象，推測³³S啟動子屬于

組成型

組成型

啟動子。
（2）圖2是科研人員擴增Rd29A啟動子所設計的引物，根據(jù)引物的堿基序列及限制酶的識別序列分析，構建載體2時選用的限制酶是

SacⅠ和SmaⅠ

SacⅠ和SmaⅠ

。為了改造載體1中的啟動子，需要用

BclⅠ和SacⅠ

BclⅠ和SacⅠ

酶切割載體1、2為最佳。
（3）構建Rd29A啟動子驅動AmDHN基因的表達載體后，先將其導入

農桿菌

農桿菌

，再轉化苜蓿。轉化后應在培養(yǎng)基中添加

新霉素

新霉素

進行篩選。
（4）為檢測轉基因苜蓿中AmDHN基因的表達水平，科研人員做了相關實驗。下表呈現(xiàn)了部分操作步驟，請完成表格：

實驗步驟的目的	簡要操作過程
① 使幼苗適應外界的自然環(huán)境（進行煉苗） 使幼苗適應外界的自然環(huán)境（進行煉苗）	在轉基因無菌苗根系長至2-3 cm時，將培養(yǎng)無菌苗三角瓶的封口膜打開，培養(yǎng)一周，觀察其生長狀況
提供適宜生長條件	將甲組幼苗根系至于300mL水中
模擬干旱脅迫條件	② 將乙組幼苗根系置于等量的20%PEG溶液中 將乙組幼苗根系置于等量的20%PEG溶液中
無關變量控制	將甲、乙兩組置于溫度、光照等條件適宜且相同的環(huán)境中培養(yǎng)8h,之后剪取兩組葉片放在液氮中儲存
③ 檢測PCR擴增產物量，估算目的基因的表達量 檢測PCR擴增產物量，估算目的基因的表達量	對葉片研磨、離心后，提取總RNA，以 AmDHN和 MtActin基因兩端脫氧核苷酸序列為依據(jù)設計引物，進行RT-PCR擴增，其中MtActin（一種細胞骨架蛋白）為內參。擴增產物用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測，EB（澳化乙錠＞染色照相如圖。