2017年CAR-T療法獲批可用于癌癥治療。其核心是將具有腫瘤識別功能的CAR基因整合到人體T淋巴細胞,形成能準確定位并殺死癌細胞的CAR-T細胞,請回答下列問題:
(1)已知CAR基因的全部序列,科研人員通過
人工合成
人工合成
法和PCR技術(shù)可獲得大量該基因片段。在PCR反應(yīng)體系中除模板外還需加入
引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶和4種脫氧核糖核苷酸
引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶和4種脫氧核糖核苷酸
。
(2)治療基本過程是:分離患者T細胞并構(gòu)建CAR-慢病毒運載體→體外基因轉(zhuǎn)移形成CAR-T細胞→篩選、培養(yǎng)CAR-T細胞→輸入患者體內(nèi),該療法屬于
體外基因
體外基因
治療,該運載體進入人體細胞的方式通常是
胞吞
胞吞
。該方法采用的是自身T細胞,而不用異體T細胞,其原因是
避免發(fā)生排斥反應(yīng)
避免發(fā)生排斥反應(yīng)
。
(3)為檢查CAR基因能否在T細胞中翻譯成蛋白質(zhì),可采用
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
法檢測,CAR-T細胞培養(yǎng)所需CO
2的主要作用是
維持pH的穩(wěn)定
維持pH的穩(wěn)定
,傳代培養(yǎng)時,貼滿瓶壁的細胞需要用
胰蛋白酶或膠原蛋白酶
胰蛋白酶或膠原蛋白酶
處理后再進行分瓶培養(yǎng)。