21.2017年CAR-T療法獲批可用于癌癥治療。其核心是將具有腫瘤識別功能的CAR基因整合到人體T淋巴細(xì)胞,形成能準(zhǔn)確定位并殺死癌細(xì)胞的CAR-T細(xì)胞,請回答下列問題:
(1)已知CAR基因的全部序列,科研人員通過
法和PCR技術(shù)可獲得大量該基因片段。在PCR反應(yīng)體系中除模板外還需加入
。
(2)治療基本過程是:分離患者T細(xì)胞并構(gòu)建CAR-慢病毒運(yùn)載體→體外基因轉(zhuǎn)移形成CAR-T細(xì)胞→篩選、培養(yǎng)CAR-T細(xì)胞→輸入患者體內(nèi),該療法屬于
治療,該運(yùn)載體進(jìn)入人體細(xì)胞的方式通常是
。該方法采用的是自身T細(xì)胞,而不用異體T細(xì)胞,其原因是
。
(3)為檢查CAR基因能否在T細(xì)胞中翻譯成蛋白質(zhì),可采用
法檢測,CAR-T細(xì)胞培養(yǎng)所需CO
2的主要作用是
,傳代培養(yǎng)時(shí),貼滿瓶壁的細(xì)胞需要用
處理后再進(jìn)行分瓶培養(yǎng)。