反硝化細菌能在無氧環(huán)境中將硝酸鹽轉(zhuǎn)化為氮氣（2

NO

-

3

+10e^-+12H⁺→…N₂O→N₂），在處理工業(yè)污水、治理水體富營養(yǎng)化中具有重要作用?？蒲腥藛T想從一污水處理廠的活性污泥中篩選分離出耐高溫（42℃）的反硝化細菌（目的菌），用于提升溫度較高的工業(yè)污水的脫氮效率，具體流程如圖1所示（BTB培養(yǎng)基初始pH=6.8，BTB是酸堿指示劑，酸性條件下為黃色，中性條件下為綠色，堿性條件下為藍色）：

（1）BTB培養(yǎng)基滅菌后待平板凝固后，應倒置放在超凈臺上，目的是

防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，避免培養(yǎng)基中的水分過快的揮發(fā)

防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，避免培養(yǎng)基中的水分過快的揮發(fā)

。在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，目的是

檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格

檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格

。
（2）將污泥樣品梯度稀釋后，使用

涂布器

涂布器

（填工具）將樣液均勻涂布在BTB培養(yǎng)基上，放在

無氧、42℃

無氧、42℃

環(huán)境中培養(yǎng)2～3天后，挑選周圍顯

藍

藍

色的單菌落在固體培養(yǎng)基上劃線分離，獲得純菌株。
（3）將純菌株接種在液體培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時間，若在培養(yǎng)瓶頂部檢測到N₂O，即可鑒定為目的菌。不能依據(jù)培養(yǎng)液中硝酸鹽的濃度變低來鑒定目的菌，原因是

其他微生物也能利用硝酸鹽進行代謝，硝酸鹽濃度同樣會降低

其他微生物也能利用硝酸鹽進行代謝，硝酸鹽濃度同樣會降低

。
（4）為保持純化后的微生物菌種的純凈，需要對菌種進行保藏。臨時保藏的方法具有

保存時間短、容易被污染或產(chǎn)生變異

保存時間短、容易被污染或產(chǎn)生變異

等缺點，它比較適合那些使用頻率高的菌種的保藏。
（5）C/N（碳氮含量比）對反硝化效率有一定的影響?？蒲腥藛T測得不同C/N條件下目的菌對硝酸鹽的去除率，結(jié)果如圖2所示：
科研人員提出，在利用目的菌株處理工業(yè)污水時，需要適當向污水中投放少量淀粉，據(jù)圖分析這樣做的主要目的是

適當提高污水中的C/N，從而提高目的菌對污水中硝酸鹽的去除率

適當提高污水中的C/N，從而提高目的菌對污水中硝酸鹽的去除率

。