子宮內(nèi)膜異位癥患者常伴有不孕癥狀,患者腹腔液中含有較高濃度的白細(xì)胞介素(IL)。為探明腹腔液中存在的IL對(duì)生殖活動(dòng)的影響,科研人員利用重組人IL-1β、IL-5、IL-6對(duì)小鼠體外受精及早期胚胎發(fā)育的影響進(jìn)行了研究?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,需要從雌性小鼠體內(nèi)獲得多枚卵母細(xì)胞,一般可采取的方法是
向多只雌性小鼠注射一定量的促性腺激素,從輸卵管沖出多枚卵母細(xì)胞
向多只雌性小鼠注射一定量的促性腺激素,從輸卵管沖出多枚卵母細(xì)胞
。用電刺激法刺激雄性小鼠的射精中樞獲得精子,經(jīng)獲能
獲能
處理后,將精子與成熟的卵母細(xì)胞在HTF基礎(chǔ)培養(yǎng)液中混合培養(yǎng),完成受精。為了培養(yǎng)的細(xì)胞能正常生長(zhǎng)繁殖,需要保持培養(yǎng)液無(wú)菌、無(wú)毒
無(wú)菌、無(wú)毒
的環(huán)境。
(2)將處理后的精子和卵細(xì)胞置于HTF基礎(chǔ)培養(yǎng)液中進(jìn)行不同處理,培養(yǎng)適宜時(shí)間后,觀察受精情況,得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。
實(shí)驗(yàn)組的處理方法是向每組HTF基礎(chǔ)培養(yǎng)液中按比例分別添加IL-1β、IL-5、IL-6中的一種,控制白細(xì)胞介素的濃度分別為0.05 ng?mL-1、0.5 ng?mL-1、5 ng?mL-1、50 ng?mL-1
向每組HTF基礎(chǔ)培養(yǎng)液中按比例分別添加IL-1β、IL-5、IL-6中的一種,控制白細(xì)胞介素的濃度分別為0.05 ng?mL-1、0.5 ng?mL-1、5 ng?mL-1、50 ng?mL-1
。培養(yǎng)后取培養(yǎng)液用顯微鏡觀察,若觀察到卵細(xì)胞膜和透明帶的問(wèn)隙中有兩個(gè)極體
卵細(xì)胞膜和透明帶的問(wèn)隙中有兩個(gè)極體
,則卵細(xì)胞已完成受精。分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可得出的結(jié)論是IL能抑制小鼠受精,且隨濃度升高,抑制作用增強(qiáng)
IL能抑制小鼠受精,且隨濃度升高,抑制作用增強(qiáng)
。
(3)若要為研究IL對(duì)小鼠早期胚胎發(fā)育的影響,則需要利用上述培養(yǎng)液,繼續(xù)觀察統(tǒng)計(jì)不同發(fā)育時(shí)期胚胎的發(fā)育情況(成活率)
不同發(fā)育時(shí)期胚胎的發(fā)育情況(成活率)
。