紫杉醇是紅豆杉產(chǎn)生的一種重要抗癌物質(zhì),利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得紫杉醇的基本過程如圖所示。回答下列問題:
(1)外植體經(jīng)
脫分化
脫分化
過程形成愈傷組織。用纖維素酶和果膠酶對愈傷組織進行處理的目的是
將愈傷組織分散成單細胞
將愈傷組織分散成單細胞
。該植物組織培養(yǎng)過程屬于
C
C
(A.器官發(fā)生途徑 B.體細胞胚發(fā)生途徑 C.都不是)。
(2)將誘導(dǎo)出的愈傷組織接種至裝有液體培養(yǎng)基的三角瓶中振蕩培養(yǎng),影響細胞的生長速度和紫杉醇含量的因素有
培養(yǎng)基中植物生長調(diào)節(jié)劑配比、細胞遺傳特性、振蕩速度等
培養(yǎng)基中植物生長調(diào)節(jié)劑配比、細胞遺傳特性、振蕩速度等
等(答出兩點)。
(3)如要將外源基因?qū)爰t豆杉細胞進行遺傳改造,圖1表示構(gòu)建重組DNA的過程示意圖,載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr),回答下列問題:
①圖中酶1和酶3分別是
限制(性內(nèi)切核酸)酶、DNA連接酶
限制(性內(nèi)切核酸)酶、DNA連接酶
;
②為篩選出含重組質(zhì)粒P3的菌落,采用含有不同抗生素的平板進行篩選,得到甲、乙、丙三類菌落,三類菌落形態(tài)相同,生長情況如圖2所示,應(yīng)選擇的菌落類型是
B
B
類,未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒的菌落類型是
A
A
類;(填字母類型)
③為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒,擬設(shè)計引物進行PCR鑒定。甲、乙、丙3條引物(圖中→表示復(fù)制方向)在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置如圖3所示,PCR鑒定時應(yīng)選擇的一對引物是
乙和丙
乙和丙
,某學(xué)生嘗試用圖中另外一對引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴增出了400bp片段,原因是
目的基因反向連接
目的基因反向連接
。