53.紫杉醇是紅豆杉產(chǎn)生的一種重要抗癌物質(zhì),利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得紫杉醇的基本過程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)外植體經(jīng)
過程形成愈傷組織。用纖維素酶和果膠酶對(duì)愈傷組織進(jìn)行處理的目的是
。該植物組織培養(yǎng)過程屬于
(A.器官發(fā)生途徑 B.體細(xì)胞胚發(fā)生途徑 C.都不是)。
(2)將誘導(dǎo)出的愈傷組織接種至裝有液體培養(yǎng)基的三角瓶中振蕩培養(yǎng),影響細(xì)胞的生長(zhǎng)速度和紫杉醇含量的因素有
等(答出兩點(diǎn))。
(3)如要將外源基因?qū)爰t豆杉細(xì)胞進(jìn)行遺傳改造,圖1表示構(gòu)建重組DNA的過程示意圖,載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr),回答下列問題:
①圖中酶1和酶3分別是
;
②為篩選出含重組質(zhì)粒P3的菌落,采用含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選,得到甲、乙、丙三類菌落,三類菌落形態(tài)相同,生長(zhǎng)情況如圖2所示,應(yīng)選擇的菌落類型是
類,未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒的菌落類型是
類;(填字母類型)
③為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒,擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR鑒定。甲、乙、丙3條引物(圖中→表示復(fù)制方向)在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置如圖3所示,PCR鑒定時(shí)應(yīng)選擇的一對(duì)引物是
,某學(xué)生嘗試用圖中另外一對(duì)引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp片段,原因是
。