新冠疫苗有多種，包括滅活疫苗、腺病毒載體疫苗、重組亞單位疫苗和核酸疫苗等。如圖為其中一種疫苗的研發(fā)思路，圖中①～⑦表示過(guò)程，箭頭表示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn)（四種酶的識(shí)別序列詳見(jiàn)表），標(biāo)記基因SUC2控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存。
| 限制酶 |
NcoⅠ |
SphⅠ |
NheⅠ |
BamHⅠ |
| 識(shí)別序列和切割位點(diǎn) |
C↓CATGG |
CCATG↓C |
G↓GATCC |
G↓CTAGC |
（1）圖中①過(guò)程需要使用逆轉(zhuǎn)錄酶先得到cDNA，再使用
PCR
PCR
技術(shù)擴(kuò)增得到S基因。完成以后，常采用
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
鑒定擴(kuò)增產(chǎn)物。
（2）為使③過(guò)程順利進(jìn)行，需先使用限制酶
NcoⅠ
NcoⅠ
和
NheⅠ
NheⅠ
切割質(zhì)粒B，選用兩種限制酶對(duì)新冠病毒的S基因進(jìn)行切割的目的是
防止S基因自身環(huán)化（防止載體自身環(huán)化、防止S基因與載體反向連接）
防止S基因自身環(huán)化（防止載體自身環(huán)化、防止S基因與載體反向連接）
（答出一點(diǎn)即可）。
（3）圖中表示篩選的過(guò)程是⑤，為達(dá)到利用標(biāo)記基因篩選的目的，普通的P型酵母菌應(yīng)該滿足的條件是
不能合成蔗糖酶，無(wú)法利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存
不能合成蔗糖酶，無(wú)法利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存
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