平菇具有味道鮮美，抗雜菌污染的優(yōu)勢(shì)，杏鮑菇具有菌絲強(qiáng)壯，生長(zhǎng)旺盛的優(yōu)勢(shì)。為獲得具有優(yōu)良性狀的平菇形菌株，研究者利用原生質(zhì)體融合技術(shù)，進(jìn)行了如下研究。
（1）以原生質(zhì)體融合技術(shù)培育雜種新菌株的典型優(yōu)勢(shì)是
打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種
打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種
。
（2）用酶解法處理平菇和杏鮑菇獲取原生質(zhì)體時(shí)，要嚴(yán)格控制酶的
使用種類、濃度、溫度和處理時(shí)間等
使用種類、濃度、溫度和處理時(shí)間等
（至少寫(xiě)兩點(diǎn)），以獲得存活質(zhì)量較高的原生質(zhì)體。培養(yǎng)原生質(zhì)體時(shí)，需要向培養(yǎng)液中加入適宜濃度的甘露醇來(lái)維持
（一定的）滲透壓
（一定的）滲透壓
，以維持細(xì)胞正常的形態(tài)和功能。
（3）采用不同濃度PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示
表1
| PEG質(zhì)量分?jǐn)?shù) |
25% |
30% |
35% |
40% |
| 原生質(zhì)體狀態(tài) |
有破碎現(xiàn)象啞鈴型細(xì)胞比例＜0.01% |
表現(xiàn)正常啞鈴型細(xì)胞比例0.03% |
原生質(zhì)體出現(xiàn)縮小現(xiàn)象啞鈴型細(xì)胞比例0.01～0.02% |
原生質(zhì)體出現(xiàn)縮小現(xiàn)象啞鈴型細(xì)胞比例0.01～0.02% |
兩個(gè)原生質(zhì)體融合效果較好時(shí)會(huì)呈現(xiàn)啞鈴型細(xì)胞，融合的原理是
細(xì)胞膜的流動(dòng)性
細(xì)胞膜的流動(dòng)性
。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：
質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%的PEG溶液誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合效果最好，高于或低于30%不利于獲得融合的原生質(zhì)體
質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%的PEG溶液誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合效果最好，高于或低于30%不利于獲得融合的原生質(zhì)體
。
（4）鑒定菌株間遺傳關(guān)系時(shí)，常將待測(cè)菌株的菌絲體接種于同一培養(yǎng)基內(nèi)，若兩菌絲體間長(zhǎng)出“拮抗線”，說(shuō)明二者的遺傳關(guān)系較遠(yuǎn)（見(jiàn)圖1）。借助此原理，快速篩選出一株與兩親本菌株遺傳關(guān)系較遠(yuǎn)的融合菌株X，請(qǐng)?jiān)趫D2中繪制模式圖，標(biāo)注接種菌絲體位置，注明菌株類型，并預(yù)測(cè)拮抗線的位置。
（5）對(duì)上述融合菌株接種培養(yǎng)，篩選出外形為平菇形的5株新菌株，結(jié)果如表2所示。
表2
| 菌株編號(hào) |
長(zhǎng)滿營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)的時(shí)間/（d） |
平均產(chǎn)量/（kg?sack-1） |
| 1 |
27 |
0.55 |
| 2 |
27.6 |
0.54 |
| 3 |
26.4 |
0.51 |
| 4 |
26.2 |
0.68 |
| 5 |
25.8 |
0.58 |
根據(jù)上述結(jié)果，科研人員最終選擇
菌株4
菌株4
作為目的菌種。目的菌種在向菌農(nóng)推廣前，還需要進(jìn)行
營(yíng)養(yǎng)成分（能否穩(wěn)定遺傳）
營(yíng)養(yǎng)成分（能否穩(wěn)定遺傳）
等檢測(cè)。
