隨著人類基因組計(jì)劃的進(jìn)展和多種生物基因組測(cè)序工作的完成,人類跨入了后基因組和蛋白質(zhì)組時(shí)代。對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行研究時(shí),首先要獲得純度較高的蛋白質(zhì)。如圖1是某生物興趣小組在“蛋白質(zhì)的提取和分離”實(shí)驗(yàn)中,準(zhǔn)備從豬的血液中初步提取血紅蛋白,設(shè)計(jì)的“血紅蛋白提取、分離流程圖”:
請(qǐng)回答下列有關(guān)問題:
(1)樣品處理中紅細(xì)胞的洗滌要用
生理鹽水
生理鹽水
反復(fù)沖洗、離心。向紅細(xì)胞懸液中加入一定量的低濃度PH7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢?,可以破碎紅細(xì)胞,破碎細(xì)胞的原理是滲透(作用)原理(當(dāng)外界溶液濃度低于動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)液濃度時(shí),細(xì)胞吸水漲破)
滲透(作用)原理(當(dāng)外界溶液濃度低于動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)液濃度時(shí),細(xì)胞吸水漲破)
。
(2)血紅蛋白粗分離階段,透析的目的是除去小分子雜質(zhì)
除去小分子雜質(zhì)
,若要盡快達(dá)到理想的透析效果,可以增加緩沖液的量或及時(shí)更換緩沖液。
(3)血紅蛋白的純化是通過凝膠色譜
凝膠色譜
法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去。
(4)電泳利用了待分離樣品中各種分子的帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀
帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀
等的差異,而產(chǎn)生不同遷移速度,實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。
(5)一同學(xué)通過血紅蛋白醋酸纖維薄膜電泳,觀察到正常人和鐮刀型細(xì)胞貧血癥患者的血紅蛋白電泳結(jié)果如圖2所示。由圖2可知攜帶者有2
2
種血紅蛋白,從分子遺傳學(xué)的角度作出的解釋是攜帶者具有一對(duì)等位基因,可以控制合成兩種不同的蛋白質(zhì)
攜帶者具有一對(duì)等位基因,可以控制合成兩種不同的蛋白質(zhì)
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