破傷風(fēng)類(lèi)毒素單克隆抗體可以用于破傷風(fēng)的快速檢測(cè)及治療。如圖是我國(guó)科學(xué)工作者制備破傷風(fēng)類(lèi)毒素單克隆抗體的過(guò)程示意圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比,最大的優(yōu)越性是
能準(zhǔn)確識(shí)別抗原的細(xì)微差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,大量制備
能準(zhǔn)確識(shí)別抗原的細(xì)微差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,大量制備
。單克隆抗體制備過(guò)程運(yùn)用了 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
和 動(dòng)物細(xì)胞融合
動(dòng)物細(xì)胞融合
等技術(shù)手段,前一過(guò)程是制備單克隆抗體的基礎(chǔ),且需置于含95%空氣加5%CO2
95%空氣加5%CO2
的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),其中CO2的作用是 維持培養(yǎng)液的pH
維持培養(yǎng)液的pH
。
(2)過(guò)程⑤所用的HAT培養(yǎng)基從用途上看屬于 選擇
選擇
培養(yǎng)基。在該培養(yǎng)基上,未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞
未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞
都會(huì)死亡,只有 融合的雜交瘤
融合的雜交瘤
才能生長(zhǎng)。經(jīng)過(guò)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和 抗體檢測(cè)
抗體檢測(cè)
,經(jīng)多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需特異抗體的細(xì)胞。
(3)過(guò)程⑥中將雜交瘤細(xì)胞多倍稀釋?zhuān)臃N在96孔板的細(xì)胞培養(yǎng),使每孔細(xì)胞盡量只接種 1
1
個(gè),通過(guò)培養(yǎng)讓其增殖,然后通過(guò)ELISA法(又稱(chēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)檢測(cè)各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體,可與 特定抗原(破傷風(fēng)類(lèi)毒素)
特定抗原(破傷風(fēng)類(lèi)毒素)
結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽(yáng)性孔。最后將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng),或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從 細(xì)胞培養(yǎng)液
細(xì)胞培養(yǎng)液
或小鼠腹水中,就可以提取出大量的單克隆抗體。