魚腥草是一種需求量較大的常用中草藥，人工栽培中易感染病菌導致產量降低?？蒲腥藛T利用基因工程技術將抗菌肽基因轉入魚腥草中提高其抗病性（如圖），請回答下列問題。

（1）為獲得較多的抗菌肽基因用于操作，需要用PCR技術對抗菌肽基因進行擴增，其原理是

DNA復制

DNA復制

。對該反應體系中的兩種引物的設計要求之一是：兩種引物之間不能發(fā)生堿基互補配對，防止

引物之間結合形成雙鏈，以免影響引物與 DNA模板鏈的結合

引物之間結合形成雙鏈，以免影響引物與 DNA模板鏈的結合

。
（2）圖中①過程為

構建基因表達載體

構建基因表達載體

，不能將抗菌肽基因直接導入受體細胞的原因是

缺少啟動子、終止子，目的基因在受體細胞中不能表達

缺少啟動子、終止子，目的基因在受體細胞中不能表達

。
（3）步驟②中一般情況下需要用Ca²⁺對農桿菌進行處理，目的是

提高農桿菌吸收重組質粒（外源DNA片段）的能力

提高農桿菌吸收重組質粒（外源DNA片段）的能力

。影響農桿菌轉化效率的因素有

農桿菌的濃度、農桿菌的種類、酚類物質的含量等

農桿菌的濃度、農桿菌的種類、酚類物質的含量等

（答2點即可）。
（4）經鑒定，轉基因成功的標志是

轉基因魚腥草產生有活性的抗菌肽 （或轉基因魚腥草的抗病菌能力得到提高）

轉基因魚腥草產生有活性的抗菌肽 （或轉基因魚腥草的抗病菌能力得到提高）

。