大豆原產(chǎn)中國(guó),已有五千年栽培歷史,古稱“菽”。大豆為一年生草本,莖粗壯直立,密被褐色長(zhǎng)硬毛。葉通常具3小葉,兩性花,自然下既可自花傳粉也可異花傳粉。研究者在大豆突變體庫(kù)中篩選出純合突變體甲,并對(duì)其展開(kāi)研究。突變體甲表現(xiàn)為葉皺縮型,如圖1。
(1)以突變體甲與野生型大豆為親本,進(jìn)行正反交獲得F1。采用特異性引物對(duì)兩親本基因組DNA 進(jìn)行PCR擴(kuò)增得到兩親本的差異性條帶,可用于雜種植株的鑒定。圖2是用該引物對(duì)雙親及F1植株進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。
據(jù)結(jié)果判斷,1~10中
3、4、7、9
3、4、7、9
是雜交成功獲得的F1植株;推測(cè)F1中出現(xiàn)其它植株的最可能原因是 親本發(fā)生自交
親本發(fā)生自交
。F1自交收獲F2,發(fā)現(xiàn)突變型124株、野生型380株,說(shuō)明突變體甲葉型突變的遺傳符合孟德?tīng)柕幕蚍蛛x定律。
(2)研究發(fā)現(xiàn)突變體甲是7號(hào)染色體片段缺失導(dǎo)致的,預(yù)測(cè)該缺失范圍內(nèi)有6個(gè)基因(記為基因1~6)最有可能與甲的葉皺縮有關(guān),而這6個(gè)基因在8號(hào)染色體上均有功能類似的基因(記為基因1'~6')。為確定基因1~6中與甲的葉皺縮直接相關(guān)的基因,研究者從野生型 葉片
葉片
細(xì)胞中提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA 作為PCR模板,根據(jù)上述基因設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增。結(jié)果發(fā)現(xiàn)只擴(kuò)增出基因1~4,以及基因1'、3'、5'、6',故鎖定基因 2、4
2、4
作為重點(diǎn)研究對(duì)象,后命名為基因P和基因Q。
(3)研究者將同為葉皺縮表型的突變體乙與突變體甲雜交,子代均表現(xiàn)為葉皺縮,說(shuō)明突變體乙與突變體甲的突變位點(diǎn)是 相同
相同
(相同/不同)的。進(jìn)一步對(duì)突變體乙的基因測(cè)序,發(fā)現(xiàn)僅有基因Q發(fā)生突變。為確定基因Q的功能,將該基因轉(zhuǎn)入 基因Q突變(突變體乙)
基因Q突變(突變體乙)
的大豆中,若發(fā)現(xiàn) 轉(zhuǎn)基因的突變體葉表型恢復(fù)為野生型
轉(zhuǎn)基因的突變體葉表型恢復(fù)為野生型
,則可證實(shí)基因Q與葉片正常發(fā)育直接相關(guān)。
(4)研究發(fā)現(xiàn)基因Q與大豆葉表皮角質(zhì)層的發(fā)育過(guò)程有關(guān),角質(zhì)層具有保水、抵抗病菌和昆蟲(chóng)侵襲等作用。請(qǐng)預(yù)期該研究的應(yīng)用價(jià)值:對(duì)培育抗旱、抗病蟲(chóng)的大豆新品種具有重要意義
對(duì)培育抗旱、抗病蟲(chóng)的大豆新品種具有重要意義
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