非洲豬瘟是非洲豬瘟病毒（ASFV）引起的傳染病，致死率極高。P30蛋白是ASFV表面的結(jié)構(gòu)蛋白之一。為盡早檢測出豬是否被該病毒感染，科研人員對P30蛋白單克隆抗體的制備進行研究。
（1）科研人員在ASFV的諸多蛋白中，針對P30蛋白制備單克隆抗體的理由是

P30蛋白是ASFV表面特有的蛋白質(zhì)

P30蛋白是ASFV表面特有的蛋白質(zhì)

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（2）用P30蛋白免疫健康小鼠，取脾細(xì)胞，利用

聚乙二醇（PEG）

聚乙二醇（PEG）

作為促融劑，與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得雜交瘤細(xì)胞。
（3）將上述細(xì)胞稀釋后置于96孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)，10天后進行抗體檢測，原理如圖1。

?①將固定有P30蛋白的載體分為多組，每組分別加入各培養(yǎng)孔中的

上清液

上清液

（細(xì)胞/上清液），孵育1h后沖洗。
②每組加入酶標(biāo)抗體孵育1h,沖洗三次，沖洗的目的是

將未與待測抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗體沖洗掉

將未與待測抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗體沖洗掉

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③每組加入相應(yīng)酶促反應(yīng)底物，選擇

顏色深

顏色深

的組別所對應(yīng)培養(yǎng)孔，將其中的細(xì)胞進一步克隆化培養(yǎng)，獲得穩(wěn)定分泌P30蛋白單克隆抗體的細(xì)胞系5E8。
（4）為進一步提高診斷效率，研究人員將P30蛋白中的6個肽段（圖2的TQ、IV、AE、FK、QK、GK）分別與細(xì)胞系5E8分泌的單抗進行反應(yīng)，結(jié)果如圖3。?
①據(jù)圖分析，P30蛋白中與單抗結(jié)合特異性最強的肽段由

46

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個氨基酸組成。
②基于以上研究，請?zhí)岢鲋苽銩SFV單抗的優(yōu)化方案

單抗制備過程中，用FK作為抗原免疫小鼠

單抗制備過程中，用FK作為抗原免疫小鼠

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