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生物科技廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，以改善農(nóng)作物品質(zhì)、提高產(chǎn)量。植物成熟果實細胞中會表達大量的半乳糖醛酸酶（PG），導(dǎo)致成熟果實易于損傷?？茖W(xué)家利用番茄的PG基因構(gòu)建反義PG基因表達載體，導(dǎo)入番茄細胞，培育出轉(zhuǎn)基因延熟番茄。圖甲是反義PG基因的作用機理，圖乙是質(zhì)粒結(jié)構(gòu)圖及相應(yīng)的酶切位點?；卮鹣铝袉栴}。
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（1）從番茄細胞中提取PG基因轉(zhuǎn)錄的mRNA，經(jīng)過
逆轉(zhuǎn)錄（或反轉(zhuǎn)錄）
逆轉(zhuǎn)錄（或反轉(zhuǎn)錄）
產(chǎn)生cDNA，再用
PCR
PCR
技術(shù)體外擴增。該技術(shù)需先設(shè)計合成
引物
引物
，并使用
熱穩(wěn)定性DNA聚合（Taq）
熱穩(wěn)定性DNA聚合（Taq）
酶來催化。
（2）構(gòu)建反義PG基因表達載體時需在啟動子和終止子之間反向插入PG基因。為使目的基因與質(zhì)粒正確連接，并提高兩者重組的成功率，需在擴增的目的基因兩端分別引入
BamHI和EcoRI
BamHI和EcoRI
（填“EcoRⅠ和EcoRⅠ”“BamHⅠ和BamHⅠ”或“BamHⅠ和EcoRⅠ”）限制酶的識別序列。質(zhì)粒上有標(biāo)記基因，利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細胞，方法是
將待篩選的宿主細胞接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中，能夠生長的是含有質(zhì)粒載體的宿主細胞
將待篩選的宿主細胞接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中，能夠生長的是含有質(zhì)粒載體的宿主細胞
。
（3）用含反義PG基因的農(nóng)桿菌侵染番茄細胞，再通過
植物組織培養(yǎng)
植物組織培養(yǎng)
技術(shù)培育出轉(zhuǎn)基因番茄。在轉(zhuǎn)基因番茄中，反義PG基因能抑制PG合成的原因是阻斷了
PG基因表達過程中的翻譯階段
PG基因表達過程中的翻譯階段
。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄（或反轉(zhuǎn)錄）；PCR；引物；熱穩(wěn)定性DNA聚合（Taq）；BamHI和EcoRI；將待篩選的宿主細胞接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中，能夠生長的是含有質(zhì)粒載體的宿主細胞；植物組織培養(yǎng)；PG基因表達過程中的翻譯階段
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：26引用：2難度：0.5
相似題

  • 1．科研小組利用基因工程技術(shù)將“抗蟲基因”轉(zhuǎn)入棉花細胞成功培育出抗蟲棉，該技術(shù)所用的含“抗蟲基因”的DNA與質(zhì)粒上相關(guān)限制酶的酶切位點分別如圖1、圖2所示（不同限制酶的識別序列和酶切位點：BamHⅠ5′-G↓GATCC-3′，BclⅠ5′-T↓GATCA-3′，Sau3AⅠ5′-↓GATC-3′，HindⅢ5′-A↓AGCTT-3′）。請分析并回答以下問題：
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    （1）將抗蟲基因轉(zhuǎn)入棉花細胞前，可以通過PCR擴增獲得大量抗蟲基因，PCR擴增前應(yīng)根據(jù)
     
    設(shè)計引物。培育轉(zhuǎn)基因棉花的核心工作是
     
    。由圖1和圖2分析可知，研究人員應(yīng)選擇
     
    限制酶處理含抗蟲基因的DNA片段，在處理質(zhì)粒的時候應(yīng)選擇
     
    限制酶。
    （2）蛋白酶抑制劑基因也是一種抗蟲基因，某研究團隊將胰蛋白酶抑制劑（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPin1A）的基因單獨或共同轉(zhuǎn)化，獲得轉(zhuǎn)基因植株。
    ①將抗蟲基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)時，除了采用我國科學(xué)家獨創(chuàng)的花粉管通道法，還可以采用
     
    法，使用該方法時，應(yīng)將抗蟲基因插入到質(zhì)粒的
     
    區(qū)域。
    ②標(biāo)記基因可用于檢測目的基因是否導(dǎo)入，由圖2可知，應(yīng)選含有
     
    的培養(yǎng)基篩選含有重組質(zhì)粒的細胞。為了檢測目的基因在受體細胞中是否穩(wěn)定表達，在分子水平上的檢測方法為
     
    。
    ③圖3為將胰蛋白酶抑制劑（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPin1A）的基因單獨或共同轉(zhuǎn)化的實驗結(jié)果，據(jù)結(jié)果分析，
     
    （選填“NaPI”或“StpinlA”或“NaPI+StpinlA”）轉(zhuǎn)基因棉花的抗蟲效果最佳，得出該結(jié)論的原因是
     
    。

    發(fā)布：2024/11/19 5:30:2組卷：38引用：2難度：0.5

  • 2．某科研小組從土壤菌株A、B中分離到同源性為93%的Bt1抗蟲基因和Bt2抗蟲基因的編碼序列，并運用交錯延伸PCR技術(shù)獲得了抗蟲性能強的重組B基因，轉(zhuǎn)入煙草獲得成功，過程如圖所示。下列選項正確的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)
    注：①交錯延伸PCR：基因Bt1和Bt2均作為模板，所需引物相同，圖中僅示其中一條鏈的延伸情況。②啟動子Pr1a可在煙草葉肉細胞中特異性啟動基因的轉(zhuǎn)錄。③圖中生長素合成酶基因是通過成熟mRNA逆轉(zhuǎn)錄獲得的DNA片段，可使植物細胞合成生長素。

    發(fā)布：2024/11/16 21:0:1組卷：36引用：2難度：0.5

  • 3．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7
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