干燥綜合征（SS）是一種自身免疫病，患者血清中存在多種抗體，其中SSB抗體特異性最強。科研人員為生產SSB抗體的檢測試劑，利用基因工程獲得重組SSB蛋白，流程如圖，請回答：

（1）利用RNA通過①過程獲得CDNA需要
逆轉錄
逆轉錄
酶，從而獲得SSB基因，SSB基因通過PCR擴增，其延伸階段需要
Taq（DNA聚合）或耐高溫DNA聚合
Taq（DNA聚合）或耐高溫DNA聚合
參與，而且在緩沖液中添加
Mg²⁺
Mg²⁺
以便激活該酶的活性。
（2）目的基因片段擴增n代，共需要個
2ⁿ⁺¹-2
2ⁿ⁺¹-2
引物，共獲得
2ⁿ-2n
2ⁿ-2n
個短鏈、等長的目的基因。
（3）PCR循環(huán)之前，常要進行一次預變性，預變性的目的是增加
模板DNA徹底變性
模板DNA徹底變性
的概率，用PCR方法擴增目的基因時
不必
不必
（填“必須”或“不必”）知道基因的全部序列。
（4）為與PET41a質粒連接，獲得的目的基因A兩端要含有
BamHⅠ和XhoⅠ
BamHⅠ和XhoⅠ
（寫出限制酶名稱）酶切位點。
（5）獲得含SSB基因的重組質粒后，進行如下實驗切割原質粒和重組質粒，獲得片段大小見表格（1kb=1000堿基對），分析數據，計算可得SSB基因的長度為
3kb
3kb
。與人基因組文庫中的SSB基因相比，通過①過程獲得的SSB基因結構特點是
沒有啟動子和內含子等
沒有啟動子和內含子等
。

限制酶 EcoRⅠ BanHⅠ和XhoⅠ

原質粒 8.1kb 2.7kb、5.4kb

重組質粒 3.4kb、5.0kb 未做該處理

（6）②過程目的是將重組質粒轉入到處于
感受態(tài)
感受態(tài)
的大腸桿菌內，并接種于添加
卡那霉素
卡那霉素
的培養(yǎng)基上，收集菌落進行簽定，將陽性菌落進一步純化后再將菌體破碎處理，篩選得到重組SSB蛋白。

【答案】逆轉錄；Taq（DNA聚合）或耐高溫DNA聚合；Mg²⁺；2ⁿ⁺¹-2；2ⁿ-2n；模板DNA徹底變性；不必；BamHⅠ和XhoⅠ；3kb；沒有啟動子和內含子等；感受態(tài)；卡那霉素

【解答】

【點評】

聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有，未經書面同意，不得復制發(fā)布。

發(fā)布：2024/9/13 4:0:9組卷：11難度：0.5

相似題

1．限制酶a、限制酶b能將某線性DNA分子片段切割，其識別序列和切割位點如圖所示。下列敘述錯誤的是（　?。?/h2>

A．限制酶a與限制酶b發(fā)揮作用的化學鍵完全相同

B．限制酶a與限制酶b切出的黏性末端能相互連接

C．所有限制性核酸內切酶識別的序列都由6個核苷酸組成

D．限制酶將該DNA分子切成2個片段需消耗2個水分子

發(fā)布：2024/11/10 15:30:3組卷：21引用：5難度：0.7

A．圖甲所示的質粒中還應含有復制原點和終止子等結構

B．將經轉化處理后的大腸桿菌菌液接種至培養(yǎng)基乙使用的是稀釋涂布平板法

C．配制培養(yǎng)基乙時應加入青霉素

D．培養(yǎng)基丙中生長的菌落即為導入重組質粒的大腸桿菌

發(fā)布：2024/11/10 9:0:1組卷：59引用：4難度：0.6

A．受體菌不能含有Amp^R和Tet^R基因

B．提取目的基因應選擇限制酶G和酶E的組合

C．生長激素基因與質粒結合的過程共形成了2個磷酸二酯鍵

D．用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基只能篩選出含重組質粒的受體菌

發(fā)布：2024/11/10 4:0:2組卷：20難度：0.6

把好題分享給你的好友吧~~