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菁優(yōu)網科學家通過紫外線處理大量青蒿幼苗后,偶然發(fā)現一株高產植株,通過基因測序發(fā)現該高產植株控制青蒿素合成的一種關鍵酶的基因發(fā)生了突變。請回答下列相關問題:
(1)提取了高產植株的全部DNA后,要想快速大量獲得該突變基因可以采用PCR技術,該技術的原理是
DNA復制
DNA復制
,前提是必須知道該基因的部分核苷酸序列,以便根據這一序列設計合成
引物
引物
。
(2)如果用青蒿某個時期總RNA逆轉錄產生的cDNA片段與載體連接后,儲存在一個受體菌群中,這個受體菌群就叫做青蒿的
cDNA文庫
cDNA文庫
。這些cDNA與青蒿細胞中對應基因的堿基序列
不同
不同
(填“相同”或“不同”)。
(3)將獲得的突變基因導入普通青蒿之前,先構建基因表達載體,圖1、2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請回答:
用圖1中的質粒和外源DNA構建重組質粒,不能使用SmaⅠ切割的原因是
SmaⅠ會破壞質粒的抗性基因
SmaⅠ會破壞質粒的抗性基因
、
SmaⅠ會破壞外源DNA中的目的基因
SmaⅠ會破壞外源DNA中的目的基因
。用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶比EcoRⅠ一種限制酶構建基因表達載體的優(yōu)點是
防止目的基因自我環(huán)化
防止目的基因自我環(huán)化
、
防止目的基因與質粒反向連接
防止目的基因與質粒反向連接
。用構建好的重組質粒在其目的基因前要加上特殊的啟動子,啟動子是
RNA聚合酶的識別和結合位點
RNA聚合酶的識別和結合位點
。
(4)研究人員通常采用
農桿菌轉化
農桿菌轉化
法將該突變基因導入青蒿細胞內。

【答案】DNA復制;引物;cDNA文庫;不同;SmaⅠ會破壞質粒的抗性基因;SmaⅠ會破壞外源DNA中的目的基因;防止目的基因自我環(huán)化;防止目的基因與質粒反向連接;RNA聚合酶的識別和結合位點;農桿菌轉化
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有,未經書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4難度:0.5
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    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
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    (1)通過上述基因工程技術獲取目標產物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫下列編號)。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?;a目標蛋白
    ④目的基因導入受體細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構建表達載體
    (2)在PCR過程中,引物的功能是
     
    。
    A.啟動DNA復制
    B.規(guī)定擴增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當復制模板
    菁優(yōu)網
    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設計的PCR引物應為圖甲中的
     
    。
    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導入受體細胞。載體的化學本質是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應中,溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    (6)若目的基因MCO經限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開,才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實驗操作中,能有效鑒別載體質粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A.從抗藥性克隆中提取質粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑,以克隆的顏色進行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質粒DNA,以此為模板進行PCR檢測
    D.將Ap抗性克隆轉移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29難度:0.5
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    菁優(yōu)網
    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質粒,則產生的DNA片段的長度為( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
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