科研人員將抗鹽基因轉(zhuǎn)入普通煙草培育出抗鹽煙草，圖1表示該過程所用的質(zhì)粒，圖2表示含抗鹽基因的DNA上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。限制性核酸內(nèi)切酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ，它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為G↓GATCC、T↓GATCA、↓CATC、A↓AGCTT。圖3表示該過程中利用含目的基因的農(nóng)桿菌進(jìn)行轉(zhuǎn)化作用的示意圖。回答下列問題：

（1）利用逆轉(zhuǎn)錄獲得的目的基因和從基因組文庫中獲取的目的基因的主要區(qū)別是其不含

內(nèi)含子、啟動(dòng)子、終止子等

內(nèi)含子、啟動(dòng)子、終止子等

。
（2）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，目的基因前需要插入啟動(dòng)子，其作用是

RNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

RNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

。
（3）用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可以用限制酶BamHⅠ切割質(zhì)粒，用限制酶Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段，與單一酶切相比，這樣做是為了避免

目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化，目的基因與質(zhì)粒反向連接

目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化，目的基因與質(zhì)粒反向連接

。
（4）將目的基因插入到植物細(xì)胞染色體的DNA上，理由是

使目的基因遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)

使目的基因遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)

。
（5）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

，圖3過程

①

①

（填序號(hào)）中發(fā)生了基因重組。