腸道病毒71型（EV71）為單股正鏈RNA病毒，是引起手足口病的主要病原體之一，在EV71中，病毒結(jié)構(gòu)蛋白1（VP1）為主要的中和抗原（中和抗原與中和抗體結(jié)合后能阻止病原體入侵與增殖）。如圖為利用重組大腸桿菌表達VP1蛋白，并以VP1蛋白為抗原制備單克隆抗體的過程。回答以下問題。

（1）重組大腸桿菌中，由EV71病毒的RNA構(gòu)建cDNA需經(jīng)過

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

過程，隨后cDNA通過PCR技術(shù)擴增。將目的基因?qū)氪竽c桿菌需要構(gòu)建表達載體，常用的表達載體是

質(zhì)粒

質(zhì)粒

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（2）在小鼠腹腔內(nèi)注射VP1蛋白進行免疫，在35天獲取B淋巴細(xì)胞懸液進行融合。在獲取B淋巴細(xì)胞前3天需在腹腔再次注射VP1蛋白，這樣做的原因是

二次免疫后，產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞更多

二次免疫后，產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞更多

。
（3）缺失HPRT基因的細(xì)胞無法在HAT培養(yǎng)基中生存，HAT培養(yǎng)基可以篩選出骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞，其它細(xì)胞都會死亡。據(jù)此推測，在單克隆抗體制備過程中缺失HPRT基因的細(xì)胞是

骨髓瘤細(xì)胞

骨髓瘤細(xì)胞

（填“大腸桿菌”“B淋巴細(xì)胞”“骨髓瘤細(xì)胞”）。
（4）在雜交瘤細(xì)胞篩選培養(yǎng)過程中需在培養(yǎng)基中添加胎牛血清，并置于37℃、50mL/LCO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)箱中CO₂的作用是

維持pH值穩(wěn)定

維持pH值穩(wěn)定

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（5）該單克隆抗體成功制備后，對于防治手足口病有什么作用？

快速檢測是否感染，有效治療患者

快速檢測是否感染，有效治療患者