在基因工程的操作過程中，有多種方法可檢測目的基因是否導(dǎo)入受體菌?；卮鹣铝袉栴}：
（1）PCR檢測法：根據(jù)一段已知目的基因的核苷酸序列設(shè)計

引物

引物

，對受體菌DNA進行擴增，經(jīng)過解鏈、

復(fù)性（退火）

復(fù)性（退火）

、延伸三個步驟的循環(huán)，檢測PCR產(chǎn)物的長度是否與目的基因一致。
（2）熒光蛋白基因篩選法：某種熒光蛋白（GFP）在紫外線照射下會發(fā)出綠色熒光。用

DNA連接

DNA連接

酶將目的基因和GFP基因拼接成融合基因，并與

運載體

運載體

重組后導(dǎo)入受體菌，經(jīng)培養(yǎng)篩選能發(fā)出綠色熒光的菌落。
（3）環(huán)絲氨酸輔助篩選法：四環(huán)素能使細(xì)菌停止生長但不致死；環(huán)絲氨酸能使正常生長的細(xì)菌致死，而對停止生長的細(xì)菌不致死。某質(zhì)粒如圖所示（Amp^r表示氨芐青霉素抗性基因，Tet^r表示四環(huán)素抗性基因），Tet^r中插入目的基因后失活。用此質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體，轉(zhuǎn)化細(xì)菌后，結(jié)果有3種：未轉(zhuǎn)化的細(xì)菌、含質(zhì)粒的細(xì)菌、含重組質(zhì)粒的細(xì)菌。
①用含有

四環(huán)素

四環(huán)素

和

環(huán)絲氨酸

環(huán)絲氨酸

的培養(yǎng)基對上述3種細(xì)菌進行篩選，只有含質(zhì)粒的細(xì)菌被淘汰，理由是

含質(zhì)粒的細(xì)菌有Tet^r，四環(huán)素對其不起作用；環(huán)絲氨酸使其致死

含質(zhì)粒的細(xì)菌有Tet^r，四環(huán)素對其不起作用；環(huán)絲氨酸使其致死

；
②在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選出含重組質(zhì)粒的細(xì)菌，還需使用含有的

氨芐青霉素

氨芐青霉素

培養(yǎng)基。