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柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞桿菌引起的、發(fā)生在柑橘的一種病害。利用基因工程將來自水稻的Xa27基因?qū)敫涕偻庵搀w細胞,再利用植物組織培養(yǎng)技術可培育無病毒植株。如圖表示科研人員利用柑橘幼苗獲得抗病轉(zhuǎn)基因植株的過程,回答下列問題:
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(1)獲得轉(zhuǎn)基因抗病柑橘的核心步驟是
基因表達載體的構建
基因表達載體的構建
,該過程的操作工具包括
限制酶(限制性內(nèi)切核酸酶)和DNA連接酶
限制酶(限制性內(nèi)切核酸酶)和DNA連接酶
。
(2)共培養(yǎng)時,Ti質(zhì)粒的作用是
攜帶目的基因并整合至柑橘細胞的染色體DNA上
攜帶目的基因并整合至柑橘細胞的染色體DNA上
。
(3)脫分化與再分化過程中所用培養(yǎng)基需要更換,其中
細胞分裂素和生長素
細胞分裂素和生長素
(填激素名稱)的濃度和比例都會影響植物細胞的發(fā)育方向。
(4)從個體生物學水平鑒定轉(zhuǎn)基因柑橘植株時,發(fā)現(xiàn)有幾株不具備抗病能力,某同學推測是由于目的基因未成功導入受體細胞,另一同學認為還有可能是因為
導入植物細胞的目的基因不能表達
導入植物細胞的目的基因不能表達
。

【答案】基因表達載體的構建;限制酶(限制性內(nèi)切核酸酶)和DNA連接酶;攜帶目的基因并整合至柑橘細胞的染色體DNA上;細胞分裂素和生長素;導入植物細胞的目的基因不能表達
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/7/19 8:0:9組卷:1引用:1難度:0.6
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  • 菁優(yōu)網(wǎng)1.限制酶a、限制酶b能將某線性DNA分子片段切割,其識別序列和切割位點如圖所示。下列敘述錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/10 15:30:3組卷:21引用:5難度:0.7
  • 2.中國甜柿的自然脫澀與乙醛代謝關鍵酶基因(PDC)密切相關,推測澀味程度可能與PDC基因的表達情況有關。
    (1)啟動子位于基因首端,是RNA聚合酶識別和結合的位點,同時啟動子區(qū)域還存在著許多調(diào)控蛋白的結合位點,RNA聚合酶和調(diào)控蛋白共同影響了基因的
     
    。
    (2)為篩選PDC基因的調(diào)控蛋白,科研人員進行了下列實驗。
    ①PDC基因的啟動子序列未知,為獲得大量該基因啟動子所在片段,可利用限制酶將基因組DNA進行酶切,然后在
     
    的作用下將已知序列信息的接頭片段連接在PDC基因的上游,根據(jù)
     
    和PDC基因編碼序列設計引物進行PCR.利用質(zhì)粒A(圖1)構建含有PDC基因啟動子片段的重組質(zhì)粒并導入代謝缺陷型酵母菌,用不含
     
    的培養(yǎng)基可篩選出成功轉(zhuǎn)化的酵母菌Y1H。
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    ②質(zhì)粒G(圖2)上的AD基因表達出的AD蛋白與啟動子足夠靠近時,能夠激活后續(xù)基因轉(zhuǎn)錄,因此需獲得待測蛋白與AD蛋白的融合蛋白用于后續(xù)篩選??蒲腥藛T從中國甜柿中提取RNA,將逆轉(zhuǎn)錄形成的各種cDNA與質(zhì)粒G連接后導入酵母菌,此時應選擇質(zhì)粒G中的位點
     
    (填序號1~5)作為cDNA的插入位點,最終獲得攜帶不同cDNA片段的酵母菌群Y187。
    ③重組酵母Y187與Y1H能夠進行接合生殖,形成的接合子含有兩種酵母菌質(zhì)粒上的所有基因。若接合子能在含有金擔子素的培養(yǎng)基中生存,則推測待測蛋白是PDC基因的調(diào)控蛋白,請結合圖示闡述作出該推測的理由。

    發(fā)布:2024/11/11 0:0:2組卷:82引用:2難度:0.7
  • 3.某一質(zhì)粒載體如圖甲所示,Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tett表示四環(huán)素抗性基因。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后,與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進行連接反應,用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化后得到多種大腸桿菌,并利用培養(yǎng)基乙和丙篩選出導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌。下列敘述錯誤的是(  )
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    發(fā)布:2024/11/10 9:0:1組卷:59引用:4難度:0.6
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