慢性呼吸道多菌感染病灶中,病原菌之間通常存在著復(fù)雜的相互作用并顯著影響疾病進(jìn)程。科研人員通過對(duì)臨床慢性阻塞性肺病患者的痰液樣本進(jìn)行病原菌分離鑒定,開展病原菌互作研究。實(shí)驗(yàn)分為菌株分離和互作表型實(shí)驗(yàn)兩個(gè)階段,下列文字和圖所示圖片為實(shí)驗(yàn)過程和結(jié)果。
菌株分離:每個(gè)痰液標(biāo)本劃線于LB平板上,37℃培養(yǎng)48h后挑選表型差異明顯的單菌落分別置于LB培養(yǎng)液中搖床培養(yǎng)24h。對(duì)培養(yǎng)的每個(gè)菌株物種鑒定后,選出一株大腸桿菌和銅綠假單胞菌分別命名為COP1512、PAO1。
互作表型實(shí)驗(yàn):為了解COP1512、PAO1的互作,構(gòu)建兩個(gè)距離培養(yǎng)互作實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀?br />模型一:梯度間距培著實(shí)驗(yàn)(實(shí)驗(yàn)過程、結(jié)果如圖甲、圖乙所示)
模型二:胞外產(chǎn)物平板距離實(shí)驗(yàn)(實(shí)驗(yàn)過程和結(jié)果如圖丙、圖丁所示)
請(qǐng)根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)過程和結(jié)果回答下列問題:
(1)請(qǐng)列舉菌株分離實(shí)驗(yàn)中的菌落“表型”的有:
菌落的大小、形態(tài)等(顏色、光澤度、透明度、質(zhì)地、隆起狀態(tài)、邊緣特征)
菌落的大小、形態(tài)等(顏色、光澤度、透明度、質(zhì)地、隆起狀態(tài)、邊緣特征)
(至少寫兩個(gè))。搖床培養(yǎng)的目的有:
使菌種與培養(yǎng)基充分接觸;增加培養(yǎng)液中溶解氧含量
使菌種與培養(yǎng)基充分接觸;增加培養(yǎng)液中溶解氧含量
(請(qǐng)回答兩點(diǎn))。
(2)圖甲中平板上每個(gè)點(diǎn)的接菌量為2μL,接種工具為
微量移液器
微量移液器
。
(3)分析互作表型實(shí)驗(yàn)結(jié)果,得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論:
①圖甲和圖乙結(jié)果表明,PAO1的生長幾乎不受COP1512的影響;而
靠近PAO1的COP1512菌落生長受到抑制,隨著培養(yǎng)天數(shù)增加,PAO1對(duì)COP1512的抑制效果越來越明顯,遠(yuǎn)離PAO1的COP1512生長幾乎不受抑制
靠近PAO1的COP1512菌落生長受到抑制,隨著培養(yǎng)天數(shù)增加,PAO1對(duì)COP1512的抑制效果越來越明顯,遠(yuǎn)離PAO1的COP1512生長幾乎不受抑制
。
②分析圖丙和圖丁,在培養(yǎng)2天挖去PAO1后再接種COP1512的平板上,菌落大小和OD值共同表明
PAO1胞外產(chǎn)物能夠抑制COP1512的生長
PAO1胞外產(chǎn)物能夠抑制COP1512的生長
。