在新冠病毒（2019-nCoV）蔓延的2020年，快速研制新冠病毒（2019-nCoV）疫苗成為有效遏制疫情的重要手段，基因工程是研制疫苗的手段之一、具體實(shí)驗(yàn)思路為通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄獲得2019-nCoV表面抗原的基因，再將其插入腺病毒中，做出以腺病毒為載體的重組疫苗。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）首先要通過(guò)
PCR
PCR
技術(shù)在體外對(duì)獲得的目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。
（2）在目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞之前需要構(gòu)建基因表達(dá)載體
基因表達(dá)載體
，此過(guò)程所需的工具酶有限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶
限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶
。
（3）一般會(huì)用兩種不同的酶切割2019-nCoV基因和運(yùn)載體DNA來(lái)獲得不同的黏性末端，這樣做的好處是避免目的基因和運(yùn)載體DNA發(fā)生自身環(huán)化
避免目的基因和運(yùn)載體DNA發(fā)生自身環(huán)化
。
（4）重組疫苗是利用改造后的腺病毒和新型冠狀病毒的S蛋白編碼基因拼裝得到的腺病毒載體疫苗。疫苗注射入人體后，免疫系統(tǒng)會(huì)識(shí)別出病毒抗原，產(chǎn)生抗病毒免疫反應(yīng)。腺病毒作為運(yùn)載體受到了科學(xué)家的青睞，理由是有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)；能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制；有標(biāo)記基因；對(duì)受體細(xì)胞無(wú)毒害作用
有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)；能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制；有標(biāo)記基因；對(duì)受體細(xì)胞無(wú)毒害作用
（寫出兩點(diǎn)）。
