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菁優(yōu)網抗菌肽通常是由幾十個氨基酸構成的小分子肽,具有廣譜的殺菌活性,對病毒和癌細胞都有一定的殺傷能力,除此之外還具有一定的免疫學活力。目前基因工程菌的異源表達系統(tǒng)在生產不同大小、折疊和復雜性的異源抗菌肽方面取得了很大的進步。圖為基因工程菌生產抗菌肽的示意圖,圖中①表示過程,②表示結構?;卮鹣铝袉栴}:
(1)圖中過程①為
基因表達載體的構建
基因表達載體的構建
,該過程所用的DNA連接根據(jù)來源不同可分為
E.coliDNA連接酶
E.coliDNA連接酶
T4DNA連接酶
T4DNA連接酶
,結構②是
重組質?;蚧虮磉_載體
重組質?;蚧虮磉_載體
。
(2)生產抗菌肽的主要表達系統(tǒng)是細菌和酵母表達系統(tǒng)。作為表達系統(tǒng),他們的組成基本相同,都是由基因表達載體及受體細胞組成的,基因表達載體中的
啟動子
啟動子
是RNA聚合酶識別和結合的部位。
(3)若圖中受體細胞是大腸桿菌,將②導入時,首先要用Ca2+處理,使細胞
處于一種容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的生理狀態(tài)(或處于感受態(tài))
處于一種容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的生理狀態(tài)(或處于感受態(tài))
;與真核生物不同,大腸桿菌表達的系統(tǒng)不具有
后期的修飾蛋白(或對多肽進行修飾加工)
后期的修飾蛋白(或對多肽進行修飾加工)
能力,使得分泌的抗菌肽的穩(wěn)定性和活性較弱。
(4)若要檢測目的基因是否表達出AMPs抗菌肽,常用的分子檢測方法為
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
。

【答案】基因表達載體的構建;E.coliDNA連接酶;T4DNA連接酶;重組質?;蚧虮磉_載體;啟動子;處于一種容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的生理狀態(tài)(或處于感受態(tài));后期的修飾蛋白(或對多肽進行修飾加工);抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有,未經書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:7引用:2難度:0.7
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  • 1.基因工程在農牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術生產人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網

    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 2.經由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應,嚴重時甚至危及生命,因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)?;a重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    (1)通過上述基因工程技術獲取目標產物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫下列編號)。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?;a目標蛋白
    ④目的基因導入受體細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構建表達載體
    (2)在PCR過程中,引物的功能是
     
    。
    A.啟動DNA復制
    B.規(guī)定擴增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當復制模板
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    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設計的PCR引物應為圖甲中的
     
    。
    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導入受體細胞。載體的化學本質是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應中,溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    (6)若目的基因MCO經限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開,才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實驗操作中,能有效鑒別載體質粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A.從抗藥性克隆中提取質粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑,以克隆的顏色進行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質粒DNA,以此為模板進行PCR檢測
    D.將Ap抗性克隆轉移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
  • 3.用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質粒,可產生14kb(1kb即1000個堿基對)的長鏈,而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質粒,可得到三種長度的DNA片段,見圖(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端)。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質粒,則產生的DNA片段的長度為( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
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