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圖1為胰島素基因結(jié)構(gòu)與引物位置示意圖，圖2為pBR322質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)示意圖，圖中EcoR I、Sma I、BamH I和HindⅢ為限制酶，箭頭或線段所指位點為對應(yīng)酶切位點。研究人員欲用此質(zhì)粒構(gòu)建胰島素基因的表達(dá)載體，培養(yǎng)能產(chǎn)生人胰島素的大腸桿菌。請回答下列相關(guān)問題：
菁優(yōu)網(wǎng)
（1）若要進(jìn)行胰島素基因的擴(kuò)增常采用
PCR
PCR
技術(shù)。已知DNA新鏈的合成方向是5′→3′，若利用圖2中質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，應(yīng)該選擇的引物為
引物4、引物5
引物4、引物5
。
（2）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時，選擇
BamHⅠ和HindⅢ
BamHⅠ和HindⅢ
作為分別切割質(zhì)粒和目的基因的限制酶，可提高目的基因和運載體的正確連接效率，其原因是
這兩種酶能切割質(zhì)粒和目的基因，且能得到不同的黏性末端，避免質(zhì)粒和目的基因自連及反接
這兩種酶能切割質(zhì)粒和目的基因，且能得到不同的黏性末端，避免質(zhì)粒和目的基因自連及反接
。
（3）成功構(gòu)建的基因表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動子等，其中啟動子的作用是
提供RNA聚合酶特異性識別和結(jié)合的位點，驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄
提供RNA聚合酶特異性識別和結(jié)合的位點，驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄
，若利用酵母菌作受體細(xì)胞生產(chǎn)胰島素，與大腸桿菌相比，利用酵母菌生產(chǎn)胰島素的優(yōu)勢有
酵母菌為真核細(xì)胞，含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可對核糖體合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工
酵母菌為真核細(xì)胞，含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可對核糖體合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工
。若要檢測導(dǎo)入酵母菌的胰島素基因是否成功轉(zhuǎn)錄，常用
DNA-RNA分子雜交
DNA-RNA分子雜交
（填“DNA-DNA分子雜交”或“DNA-RNA分子雜交”）技術(shù)。

【答案】PCR；引物4、引物5；BamHⅠ和HindⅢ；這兩種酶能切割質(zhì)粒和目的基因，且能得到不同的黏性末端，避免質(zhì)粒和目的基因自連及反接；提供RNA聚合酶特異性識別和結(jié)合的位點，驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄；酵母菌為真核細(xì)胞，含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可對核糖體合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工；DNA-RNA分子雜交
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：20引用：1難度：0.7
相似題

  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴(yán)重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)模化生產(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達(dá)。
    （1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復(fù)制
    B．規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當(dāng)復(fù)制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進(jìn)行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　　）

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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