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圖甲為構建重組質粒過程中的三種備選質粒，其中Ap為氨芐青霉素抗性基因，Tc為四環(huán)素抗性基因。圖乙為培育轉AFPs基因（抗凍基因）番茄的示意圖，外源DNA和質粒上均標出了酶切位點及相關抗性基因，請回答下列問題。
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（1）圖甲中通常選用質粒C構建重組質粒，不選用質粒A的原因是
質粒A中沒有標記基因
質粒A中沒有標記基因
；復制原點處A和T特別多，其分子機理是
氫鍵相對少，不穩(wěn)定，DNA容易解旋，容易和引物結合，作為復制起點
氫鍵相對少，不穩(wěn)定，DNA容易解旋，容易和引物結合，作為復制起點
，不選用質粒B構建重組質粒的原因是
質粒B的復制原點中含有HindⅢ酶切位點，如選用HindⅢ酶作為限制酶，會破壞復制原點
質粒B的復制原點中含有HindⅢ酶切位點，如選用HindⅢ酶作為限制酶，會破壞復制原點
。
（2）據圖乙分析，若成功構建重組質粒以利于篩選鑒定，應優(yōu)先選用的兩種限制酶分別是
BamHⅠ
BamHⅠ
和
HindⅢ
HindⅢ
切割目的基因和質粒，采用兩種限制酶的另一優(yōu)點是
避免目的基因和質粒被切割后自身環(huán)化
避免目的基因和質粒被切割后自身環(huán)化
。
（3）PCR技術的原理是
DNA半保留復制
DNA半保留復制
，通過PCR技術獲取目的基因時需設計
2
2
種引物，引物是一小段
能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對的短單鏈核酸
能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對的短單鏈核酸
。
（4）圖乙農桿菌中的質粒應含有T-DNA，其作用是
攜帶目的基因進入番茄細胞并整合到番茄細胞的染色體DNA
攜帶目的基因進入番茄細胞并整合到番茄細胞的染色體DNA
。若要獲得抗凍能力更強的抗凍番茄，可以對AFPs基因進行改造，最終得到相應的蛋白質，該過程需用到
蛋白質
蛋白質
工程。

【答案】質粒A中沒有標記基因；氫鍵相對少，不穩(wěn)定，DNA容易解旋，容易和引物結合，作為復制起點；質粒B的復制原點中含有HindⅢ酶切位點，如選用HindⅢ酶作為限制酶，會破壞復制原點；BamHⅠ；HindⅢ；避免目的基因和質粒被切割后自身環(huán)化；DNA半保留復制；2；能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對的短單鏈核酸；攜帶目的基因進入番茄細胞并整合到番茄細胞的染色體DNA；蛋白質
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有，未經書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/5/10 8:0:9組卷：0引用：1難度：0.5
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  • 1．某科研小組從土壤菌株A、B中分離到同源性為93%的Bt1抗蟲基因和Bt2抗蟲基因的編碼序列，并運用交錯延伸PCR技術獲得了抗蟲性能強的重組B基因，轉入煙草獲得成功，過程如圖所示。下列選項正確的是（　　）
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    注：①交錯延伸PCR：基因Bt1和Bt2均作為模板，所需引物相同，圖中僅示其中一條鏈的延伸情況。②啟動子Pr1a可在煙草葉肉細胞中特異性啟動基因的轉錄。③圖中生長素合成酶基因是通過成熟mRNA逆轉錄獲得的DNA片段，可使植物細胞合成生長素。

    發(fā)布：2024/11/16 21:0:1組卷：36難度：0.5

  • 2．基因工程在農牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網

    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62難度：0.7

  • 3．經由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)模化生產重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    （1）通過上述基因工程技術獲取目標產物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)模化生產目標蛋白
    ④目的基因導入受體細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構建表達載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復制
    B．規(guī)定擴增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當復制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設計的PCR引物應為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導入受體細胞。載體的化學本質是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5
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