當(dāng)前位置： 2022-2023學(xué)年遼寧省撫順市六校協(xié)作體高二（下）期末生物試卷> 試題詳情

同源重組指發(fā)生在同源DNA分子的同源序列（即堿基序列相同或相近）之間的一種重組形式。某實(shí)驗(yàn)小組利用同源重組的方法將綠色熒光蛋白（EGFP）基因插入真核表達(dá)載體的過程如圖所示，其中A～D表示操作流程?；卮鹣铝袉栴}：
（1）載體線性化后進(jìn)行的PCR過程中引物的作用是
使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
，與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制不同，PCR反應(yīng)體系中需要加入
耐高溫的DNA聚合（或TaqDNA聚合）
耐高溫的DNA聚合（或TaqDNA聚合）
酶。
（2）圖中A、B兩處PCR過程中要在載體和目的基因的兩端添加
同源序列
同源序列
。重組產(chǎn)物一般會(huì)轉(zhuǎn)入感受態(tài)細(xì)胞，獲得感受態(tài)細(xì)胞時(shí)一般先用
Ca²⁺
Ca²⁺
處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
（3）與利用限制酶和DNA連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒的常規(guī)方法相比，用該方法構(gòu)建重組質(zhì)粒的最大優(yōu)點(diǎn)是
構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)不受目的基因以及載體上限制酶位點(diǎn)的限制
構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)不受目的基因以及載體上限制酶位點(diǎn)的限制
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．

【答案】使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；耐高溫的DNA聚合（或TaqDNA聚合）；同源序列；Ca²⁺；構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)不受目的基因以及載體上限制酶位點(diǎn)的限制

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/7/5 8:0:9組卷：11引用：5難度：0.8

相似題

1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />

A．若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列

B．?dāng)U增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3′-端進(jìn)行子鏈合成

C．導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞

D．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上

發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

解析

2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命，因此必須對(duì)食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)模化生產(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國(guó)科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
（1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是

（填寫下列編號(hào)）。
①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
②選用合適的方法獲取目的基因
③借助發(fā)酵工程規(guī)模化生產(chǎn)目標(biāo)蛋白
④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
（2）在PCR過程中，引物的功能是

。
A．啟動(dòng)DNA復(fù)制
B．規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
C．解旋DNA雙鏈
D．充當(dāng)復(fù)制模板

（3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的

。
（4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是

（填DNA或RNA/DNA或RNA）。
（5）在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中，溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的

。
（6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用

和

切開，才能與MCO片段高效連接。
（7）下列實(shí)驗(yàn)操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是

。
A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)
D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長(zhǎng)與否加以鑒別
發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5
解析
3．用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個(gè)堿基對(duì)）的長(zhǎng)鏈，而同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個(gè)黏性末端）。

若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長(zhǎng)度為（　　）
A．2.5和5.5 B．2.5和6 C．5.5和8 D．6和8
發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?br />

1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />