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纖維素酶廣泛應(yīng)用在紡織、能源、食品等領(lǐng)域，提高纖維素酶的熱穩(wěn)定性可提高反應(yīng)溫度，加快降解速度研究耐熱纖維素酶在工業(yè)生產(chǎn)上具有重要意義。嗜熱梭菌是一種高溫厭氧細(xì)菌，其產(chǎn)生的β-葡萄糖苷酶（bglB）是一種耐熱纖維素酶，科研人員將bglB基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌，構(gòu)建了耐高溫的纖維素酶大腸桿菌?；卮鹣铝袉栴}：
（1）利用PCR擴(kuò)增bglB基因時，每次循環(huán)一般分為變性、
復(fù)性
復(fù)性
和
延伸
延伸
三步，其中變性的目的是
將雙鏈DNA解聚為單鏈
將雙鏈DNA解聚為單鏈
。
（2）如圖1為質(zhì)粒的限制酶酶切圖譜。bglB基因不含圖中限制酶識別序列。為使PCR擴(kuò)增的bglB基因重組進(jìn)該質(zhì)粒，bglB基因兩端需要分別引入
NdeⅠ
NdeⅠ
和
BamHⅠ
BamHⅠ
限制酶的識別序列。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌前，一般先用Ca2+處理大腸桿菌細(xì)胞，目的是
使大腸桿菌細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)
使大腸桿菌細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)
。
菁優(yōu)網(wǎng)
（3）將篩選到的轉(zhuǎn)bglB基因大腸桿菌進(jìn)行耐高溫實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖2所示。在工業(yè)生產(chǎn)上，為提高纖維素降解速率，最好將溫度控制在
60
60
℃。

【答案】復(fù)性；延伸；將雙鏈DNA解聚為單鏈；NdeⅠ；BamHⅠ；使大腸桿菌細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)；60
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/22 8:0:10組卷：1引用：2難度：0.5
相似題

  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴(yán)重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
    （1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復(fù)制
    B．規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當(dāng)復(fù)制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實(shí)驗(yàn)操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進(jìn)行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　　）

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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