以我國(guó)科學(xué)家為主的科研團(tuán)隊(duì)將OSNL(即4個(gè)基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的縮寫)導(dǎo)入黑羽雞胚成纖維細(xì)胞(CEFs),誘導(dǎo)其重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS),再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞(iPGCs),然后將iPGCs注射到孵化2.5天的白羽雞胚血管中,最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的后代,實(shí)驗(yàn)流程如圖?;卮鹣铝袉?wèn)題。
(1)CEFs是從孵化9天的黑羽雞胚中分離獲得的,為了獲得單細(xì)胞懸液,雞胚組織剪碎后需用
胰蛋白酶、膠原蛋白酶
胰蛋白酶、膠原蛋白酶
處理。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加
動(dòng)物血清
動(dòng)物血清
等天然成分,以滿足細(xì)胞對(duì)某些細(xì)胞因子的需求。
(2)體外獲取OSNL的方法有
PCR技術(shù)
PCR技術(shù)
(答出1種即可)。若要在CEFs中表達(dá)外源基因的蛋白,需構(gòu)建基因表達(dá)載體,載體中除含有目的基因和標(biāo)記基因外,還須有啟動(dòng)子和
終止子
終止子
等。啟動(dòng)子是
RNA聚合酶
RNA聚合酶
識(shí)別和結(jié)合的部位,有了它才能驅(qū)動(dòng)
目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終表達(dá)出所需要的蛋白質(zhì)
目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終表達(dá)出所需要的蛋白質(zhì)
。
(3)iPS細(xì)胞和iPGCs細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是
基因的選擇性表達(dá)
基因的選擇性表達(dá)
。
(4)該實(shí)驗(yàn)流程中用到的生物技術(shù)有
基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等
基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等
(答出1點(diǎn)即可)。