人類乳頭瘤病毒（HPV）有多種亞型，HPV45屬于高危型，與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)。L1蛋白是組成HPV病毒衣殼的主要結(jié)構(gòu)蛋白，科研人員進(jìn)行了抗HPV45L1蛋白單克隆抗體的制備及研究。
（1）提取HPV45型病毒的

L1蛋白

L1蛋白

，間隔多次注射到小鼠體內(nèi)。一段時間后，取小鼠的脾臟組織，剪碎后用

胰蛋白酶或膠原蛋白酶

胰蛋白酶或膠原蛋白酶

處理，使其分散成單個細(xì)胞，將得到的脾臟細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，用

選擇培養(yǎng)基

選擇培養(yǎng)基

篩選出雜交瘤細(xì)胞。
（2）將得到的雜交瘤細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)，分別取其上清液進(jìn)行抗體陽性檢測。檢測的原理及操作流程如圖1，實驗結(jié)果如圖2。

實驗過程中，將L1蛋白作為抗原固定，從多孔培養(yǎng)板的不同孔中分別取不同濃度的4種

雜交瘤細(xì)胞上清液

雜交瘤細(xì)胞上清液

和未免疫的小鼠血清加入到反應(yīng)體系，然后加入酶標(biāo)抗體，酶標(biāo)抗體與待測抗體發(fā)生特異性結(jié)合，此時待測抗體相當(dāng)于

抗原

抗原

，待充分反應(yīng)后測吸光值，顏色越深吸光值越高說明反應(yīng)效果越強(qiáng)。