大豆是重要的油料作物之一，在我國有悠久的種植歷史。為進一步提高大豆的品質和含油量，科研人員發(fā)現擬南芥細胞中存在某種轉錄因子能夠明顯提高其他基因的表達水平。研究人員將從擬南芥細胞中獲取的轉錄因子轉移到大豆細胞內，并使其過量表達，發(fā)現大豆中油酸和亞油酸的含量顯著提高。圖中限制酶EcoRⅤ的酶切位點為-GAT↓ATC-?；卮鹣铝袉栴}：
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（1）采用PCR技術進行可以擴增目的基因，PCR過程利用的原理是

DNA半保留復制

DNA半保留復制

。
（2）質粒P₀具有氨芐青霉素抗性基因（Amp^r）和四環(huán)素抗性基因（Tet^r），對其進行切割時應該注意

所選限制酶識別的序列不能同時存在于氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因之中（限制酶不能同時切割氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因）

所選限制酶識別的序列不能同時存在于氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因之中（限制酶不能同時切割氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因）

，以便篩選重組質粒。研究人員利用限制酶EeoRV對載體進行處理后

不能

不能

（填“能”或“不能”）與目的基因片段直接相連。
（3）P₃質粒導入受體細胞通常使用農桿菌轉化法，轉化指的是目的基因進入受體細胞，并在受體細胞內

維持穩(wěn)定和表達

維持穩(wěn)定和表達

的過程，若受體細胞能夠表現氨芐青霉素抗性，能否說明目的基因已成功導入受體細胞，并說出理由：

不能，有可能是導入了不含目的基因的P₀質粒

不能，有可能是導入了不含目的基因的P₀質粒

。
（4）導入重組質粒的受體細胞還需經過

脫分化

脫分化

和再分化過程，才能形成植株，在此過程中，受體細胞能夠培育出轉基因大豆植株利用的原理是

植物細胞具有全能性

植物細胞具有全能性

。
（5）大豆過量表達轉錄因子后，油酸和亞油酸的含量顯著提高，推測轉錄因子在細胞內發(fā)揮的作用的可能機理是

調控與油酸和亞油酸合成有關酶的基因的表達，進而促進其合成

調控與油酸和亞油酸合成有關酶的基因的表達，進而促進其合成

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