當(dāng)前位置： 2020年浙江省北斗星盟高考生物適應(yīng)性試卷（6月份）> 試題詳情

黃萎病是危害棉花種植的常見(jiàn)疾病，科學(xué)家通過(guò)基因工程技術(shù)將抗黃萎病基因--葡萄糖氧化酶基因（GO）導(dǎo)入棉花，獲得抗黃萎病棉花。已知T-DNA上的基因在農(nóng)桿菌中不表達(dá)，在植物細(xì)胞中可以表達(dá)，請(qǐng)將轉(zhuǎn)基因棉花培育步驟補(bǔ)充完整：
（1）構(gòu)建如圖所示重組Ti質(zhì)粒，用
CaCl₂
CaCl₂
處理農(nóng)桿菌，使重組Ti質(zhì)粒進(jìn)入農(nóng)桿菌中，將農(nóng)桿菌接種到含
抗卡那霉素
抗卡那霉素
的LB液體培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)。培養(yǎng)適宜時(shí)間后，離心，去除上清液，加入適量MS液體培養(yǎng)基，可通過(guò)測(cè)定菌液在600nm波長(zhǎng)處的
光密度值
光密度值
來(lái)確定農(nóng)桿菌密度是否適宜。
（2）切取經(jīng)
無(wú)菌
無(wú)菌
培養(yǎng)的棉花幼苗的下胚軸，直接轉(zhuǎn)入菌液中侵染5-10min后，倒出菌液，用滅菌濾紙吸取下胚軸表面多余菌液，將下胚軸放入愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)2天。2天后，向培養(yǎng)基中加入適量
草丁膦
草丁膦
和青霉素，其目的是篩選出轉(zhuǎn)化成功的棉花細(xì)胞和
抑制農(nóng)桿菌的生長(zhǎng)
抑制農(nóng)桿菌的生長(zhǎng)
。
（3）將所得愈傷組織接種到適宜培養(yǎng)基中培養(yǎng)，誘導(dǎo)形成胚狀體，在適宜人工條件下繼續(xù)發(fā)育成棉花幼苗。利用
抗原抗體分子雜交技術(shù)
抗原抗體分子雜交技術(shù)
技術(shù)檢測(cè)棉花細(xì)胞是否合成葡萄糖氧化酶，選出抗黃萎病棉花。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．

【答案】CaCl₂；抗卡那霉素；光密度值；無(wú)菌；草丁膦；抑制農(nóng)桿菌的生長(zhǎng)；抗原抗體分子雜交技術(shù)

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：38引用：3難度：0.7

相似題

1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />

A．若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列

B．?dāng)U增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3′-端進(jìn)行子鏈合成

C．導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞

D．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上

發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

解析

2．經(jīng)由食物攝取過(guò)量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過(guò)敏等不良反應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命，因此必須對(duì)食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來(lái)源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國(guó)科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
（1）通過(guò)上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是

（填寫下列編號(hào)）。
①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
②選用合適的方法獲取目的基因
③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標(biāo)蛋白
④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
（2）在PCR過(guò)程中，引物的功能是

。
A．啟動(dòng)DNA復(fù)制
B．規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
C．解旋DNA雙鏈
D．充當(dāng)復(fù)制模板

（3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的

。
（4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是

（填DNA或RNA/DNA或RNA）。
（5）在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中，溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的

。
（6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開(kāi)后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用

和

切開(kāi)，才能與MCO片段高效連接。
（7）下列實(shí)驗(yàn)操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是

。
A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
B．在選擇培養(yǎng)基中添加X(jué)-gal試劑，以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)
D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長(zhǎng)與否加以鑒別
發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5
解析
3．用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個(gè)堿基對(duì)）的長(zhǎng)鏈，而同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段，見(jiàn)圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個(gè)黏性末端）。

若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長(zhǎng)度為（　?。?/h2>
A．2.5和5.5 B．2.5和6 C．5.5和8 D．6和8
發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
解析

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1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?br />

1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />