為獲得具有抗玉米螟、抗除草劑草甘膦和抗旱性狀的優(yōu)良轉(zhuǎn)基因玉米，科研人員把重組到同一植物表達(dá)載體的crylAcM、epsps、GAT和ZmPIS轉(zhuǎn)入植株，獲得轉(zhuǎn)基因植株。其中crylAcM是抗玉米螟基因，epsps和GAT兩個基因同時發(fā)揮作用時，能有效提高玉米植株抗御草甘膦的能力，ZmPIS是抗旱基因。通過逐代除草劑篩選、分子檢測和抗蟲性鑒定，從大量轉(zhuǎn)基因株系中優(yōu)選出優(yōu)良玉米株系。構(gòu)建的基因表達(dá)載體部分示意圖如圖，請回答下列問題：

（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時，需要的工具有

運載體（質(zhì)粒）限制酶和DNA連接酶

運載體（質(zhì)粒）限制酶和DNA連接酶

。根據(jù)基因表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)組成分析，pUbi和P35S是

啟動子

啟動子

，其功能是

啟動子是RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點，并驅(qū)動轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行

啟動子是RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點，并驅(qū)動轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行

。
（2）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入玉米受體細(xì)胞，經(jīng)組織培養(yǎng)獲得愈傷組織，再將愈傷組織轉(zhuǎn)接到

分化培養(yǎng)基

分化培養(yǎng)基

上，培養(yǎng)至試管苗時需光照處理，原因是

光照有利于葉綠素的合成

光照有利于葉綠素的合成

。待植株長出新葉后噴灑含

除草劑（草甘膦）

除草劑（草甘膦）

的水溶液，選取存活植株移栽到溫室，以獲得具有除草劑抗性的植株。
（3）可采用PCR技術(shù)檢測抗旱基因是否導(dǎo)入玉米細(xì)胞，在PCR反應(yīng)體系中，應(yīng)加入待測玉米細(xì)胞的

基因組DNA

基因組DNA

（填“基因組DNA”或“目的基因”）、抗旱基因的

2

2

種引物、dNTP等物質(zhì)。若電泳時出現(xiàn)陽性反應(yīng)，則導(dǎo)入成功。將檢測陽性的轉(zhuǎn)基因玉米植株移栽到大田，經(jīng)

自交

自交

獲得性狀穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)基因玉米植株。