硝基苯酚(pH=7時呈黃色)是農(nóng)藥的合成前體,常常在生產(chǎn)和使用過程中釋放到環(huán)境中,對生態(tài)系統(tǒng)造成影響。實驗小組分離獲得一株假單胞菌P3,該菌對硝基苯酚具有明顯的降解能力。回答下列問題:
(1)篩選硝基苯酚降解菌株P(guān)3時,應(yīng)從
農(nóng)藥廠的廢棄淤泥中
農(nóng)藥廠的廢棄淤泥中
取樣,并轉(zhuǎn)入以硝基苯酚作為唯一碳源的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),從用途上劃分,這種培養(yǎng)基稱為 選擇培養(yǎng)基
選擇培養(yǎng)基
。篩選過程中,發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的硝基苯酚超過某一濃度時,細菌對硝基苯酚的降解量反而下降,其原因可能是 當(dāng)培養(yǎng)基中的硝基苯酚超過某一濃度時會抑制菌株生長
當(dāng)培養(yǎng)基中的硝基苯酚超過某一濃度時會抑制菌株生長
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(2)在固體培養(yǎng)基上,應(yīng)該以 黃色是否消失產(chǎn)生透明圈
黃色是否消失產(chǎn)生透明圈
作為硝基苯酚是否發(fā)生降解的指示,然后再用 平板劃線
平板劃線
法將生長狀況較好的幾種菌株接種到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中,待菌落長出后再接種到以硝基苯酚作為唯一碳源的培養(yǎng)基上,主要目的是 比較各降解菌對硝基苯酚的降解能力的強弱
比較各降解菌對硝基苯酚的降解能力的強弱
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(3)甲基對硫磷水解酶對甲基對硫磷(一種含氮有機農(nóng)藥)的降解速率較快。實驗小組以P3為受體菌,將甲基對硫磷水解酶基因mpd導(dǎo)入P3菌中,獲得了表達甲基對硫磷水解酶活性的基因工程菌PM。構(gòu)建基因表達載體所需的工具酶為 限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
將重組質(zhì)粒導(dǎo)入P3受體菌前,應(yīng)該怎樣處理P3受體菌并說明這種處理的目的:用Ca2+處理受體菌,以使受體菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)
用Ca2+處理受體菌,以使受體菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)
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