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番茄紅素是類(lèi)胡蘿卜素的一種,存在于番茄、西瓜等水果及一些蔬菜中,是目前自然界中存在的抗氧化、抗衰老和預(yù)防腫瘤能力最強(qiáng)的物質(zhì)之一,經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)合成番茄紅素的功能基因是CrtE、CrtB與Crtl。為解決植物提取法產(chǎn)量低的問(wèn)題,研究人員試通過(guò)基因工程技術(shù)來(lái)獲得大量的番茄紅素。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
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(1)為提高轉(zhuǎn)化效率,研究者根據(jù)CrtE、CrtB與Crtl基因序列及其蛋白產(chǎn)物等,將三個(gè)基因優(yōu)化設(shè)計(jì)為CrtEBI基因,并通過(guò)
化學(xué)(人工)
化學(xué)(人工)
法獲得了該基因。為了使目的基因能與表達(dá)載體正確連接,需在目的基因的兩端加上
合成兩種不同限制酶識(shí)別序列
合成兩種不同限制酶識(shí)別序列

(2)利用
(兩種不同)限制酶與DNA連接酶
(兩種不同)限制酶與DNA連接酶
酶將含有CrtEBI基因的DNA片段與質(zhì)粒pTRC99a相連。使用CaCl2處理大腸桿菌,使細(xì)胞處于一種
能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子
能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子
的生理狀態(tài),進(jìn)而將重組表達(dá)載體倒入其中。
(3)待培養(yǎng)12h后,挑取單菌落進(jìn)行PCR驗(yàn)證以確定受體細(xì)胞是否被成功導(dǎo)入目的基因。若擴(kuò)增后的DNA樣品電泳結(jié)果如圖1,則圖2(深色部分為目的基因區(qū)段)中對(duì)應(yīng)泳道1和泳道2的引物組合分別為
3、4
3、4
1、2
1、2
。(填序號(hào))

【答案】化學(xué)(人工);合成兩種不同限制酶識(shí)別序列;(兩種不同)限制酶與DNA連接酶;能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子;3、4;1、2
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/5/10 8:0:9組卷:1引用:1難度:0.5
相似題
  • 1.用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒,可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個(gè)堿基對(duì))的長(zhǎng)鏈,而同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒,可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段,見(jiàn)圖(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個(gè)黏性末端)。
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    若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒,則產(chǎn)生的DNA片段的長(zhǎng)度為( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
  • 2.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 3.經(jīng)由食物攝取過(guò)量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過(guò)敏等不良反應(yīng),嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命,因此必須對(duì)食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來(lái)源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)?;a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國(guó)科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
    (1)通過(guò)上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫(xiě)下列編號(hào))。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?;a(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    (2)在PCR過(guò)程中,引物的功能是
     
    。
    A.啟動(dòng)DNA復(fù)制
    B.規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當(dāng)復(fù)制模板
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    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     

    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中,溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開(kāi)后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開(kāi),才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實(shí)驗(yàn)操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿(mǎn)載”的是
     

    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X(jué)-gal試劑,以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長(zhǎng)與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
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