科研小組利用基因工程技術將抗蟲基因轉入棉花細胞成功培育出抗蟲棉，該技術所用的含抗蟲基因的DNA與質粒上相關限制酶的酶切位點分別如圖1、圖2所示（不同限制酶的識別序列和酶切位點：BamHⅠ5′-G↓GATCC-3′，BclⅠ5′-T↓GATCA-3′，Sau3AⅠ5′-↓GATC-3′，HindⅢ5′-A↓AGCTT-3′）。請分析并回答下列問題：

（1）將抗蟲基因轉入棉花細胞前，可以通過PCR擴增獲得大量抗蟲基因，PCR擴增前應根據(jù)

目的基因兩側的脫氧核苷酸序列

目的基因兩側的脫氧核苷酸序列

設計引物。培育轉基因棉花的核心工作是

構建基因表達載體

構建基因表達載體

。由圖1和圖2分析可知，研究人員應選擇

HindⅢ和Sat3AⅠ

HindⅢ和Sat3AⅠ

兩種限制酶切割含抗蟲基因的DNA片段，在處理質粒的時候應選擇

HindⅢ和BamHⅠ

HindⅢ和BamHⅠ

兩種限制酶。
（2）蛋白酶抑制劑基因也是一種抗蟲基因，某研究團隊將胰蛋白酶抑制劑（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPinlA）的基因單獨或共同轉化，獲得轉基因植株。
①將抗蟲基因轉入植物體內時，除了采用我國科學家獨創(chuàng)的花粉管通道法，還經(jīng)常采用

農桿菌轉化

農桿菌轉化

法，使用該方法時，應將抗蟲基因插入到質粒的

T-DNA

T-DNA

區(qū)域。
②標記基因可用于檢測目的基因是否導入，由圖2可知，應選含有

X抗生素

X抗生素

的培養(yǎng)基篩選含有重組質粒的細胞。為了檢測目的基因在受體細胞中是否穩(wěn)定表達，在分子水平上的檢測方法為

抗原抗體雜交

抗原抗體雜交

。
③圖3為將胰蛋白酶抑制劑（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPinlA）的基因單獨或共同遺傳操作的轉基因棉花抗蟲實驗結果，據(jù)結果分析，

NaPI

NaPI

（填“NaPI”“StPinlA”或“NaPI+StPinlA”）轉基因棉花的抗蟲效果最佳，得出該結論的原因是

飼喂NaPI轉基因的蟲體質量較對照組輕，且每株棉鈴蟲數(shù)較對照組少

飼喂NaPI轉基因的蟲體質量較對照組輕，且每株棉鈴蟲數(shù)較對照組少

。