灰霉病菌感染使作物減產(chǎn)，因化學(xué)防治措施會引起諸多副作用，科研人員以黃瓜灰霉病菌為指示菌對BA-KA4解淀粉芽孢桿菌的防治效果進(jìn)行了研究。
（1）BA-KA4解淀粉芽孢桿菌與酵母菌結(jié)構(gòu)最主要的區(qū)別是
沒有核膜包被的細(xì)胞核
沒有核膜包被的細(xì)胞核
。可利用 稀釋涂布平板法或平板劃線
稀釋涂布平板法或平板劃線
方法對土壤樣品中的微生物進(jìn)行分離和純化，篩選獲得BA-KA4解淀粉芽孢桿菌。
（2）實(shí)驗(yàn)一：為了確定起主要抑菌作用的是BA-KA4菌體細(xì)胞，還是BA-KA4菌體釋放到胞外的抑菌物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)步驟如下：
①挑取BA-KA4菌株單菌落接種于液體培養(yǎng)基中，28℃恒溫培養(yǎng)48 h,離心收集上清液并過孔徑0.22μm的濾膜得到無菌發(fā)酵液。收集離心獲得的菌體，超聲波破碎，用培養(yǎng)基稀釋到原體積，經(jīng)離心收集上清液為菌體破碎液。
②實(shí)驗(yàn)組和對照組處理如下表：請完善實(shí)驗(yàn)方案中的Ⅰ和Ⅱ
| 組別 |
第一步 |
第二步 |
第三步 |
抑菌率 |
| 對照組A |
Ⅰ. 1mL無菌水 1mL無菌水 |
倒入25mLPDA培養(yǎng)基，待培養(yǎng)基凝固后，在中央接入直徑5mm的灰霉菌菌塊 |
22℃恒溫培養(yǎng)至菌絲剛長滿平板時，測量灰霉菌菌落直徑（R0） |
0 |
| 實(shí)驗(yàn)組B |
加1mLBA-KA4的無菌發(fā)酵液至培養(yǎng)皿中 |
同上 |
同時測量灰霉菌的菌落直徑（R1） |
63.87% |
| 實(shí)驗(yàn)組C |
加1mLBA-KA4的菌體破碎液至培養(yǎng)皿中 |
Ⅱ 同上 同上 |
同時測量灰霉菌的菌落直徑（R2） |
41.17% |
注：PDA是馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的簡稱，抑菌率=
×100%
③實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明
該菌株的無菌發(fā)酵液具有較強(qiáng)的抑菌活性，而細(xì)胞破碎液的抑菌活性較低，說明該菌主要通過分泌到胞外的抑菌物質(zhì)起到拮抗病原菌的作用
該菌株的無菌發(fā)酵液具有較強(qiáng)的抑菌活性，而細(xì)胞破碎液的抑菌活性較低，說明該菌主要通過分泌到胞外的抑菌物質(zhì)起到拮抗病原菌的作用
。
（3）實(shí)驗(yàn)二：圖1是溫度、pH值對BA-KA4菌株的無菌發(fā)酵液抑菌穩(wěn)定性的研究結(jié)果：
實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明，BA-KA4菌株的胞外抑菌物質(zhì)有良好的溫度、pH穩(wěn)定性，可作為灰霉病菌生物防治的優(yōu)良微生物資源，具有良好的開發(fā)前景。做出此判定的依據(jù)是
無論是溫度、還是酸堿處理，BA-KA4菌株的無菌發(fā)酵液相對抑菌活性最低仍可達(dá)到55.50%，說明BA-KA4菌株胞外抑菌物質(zhì)具有良好的溫度、pH穩(wěn)定性
無論是溫度、還是酸堿處理，BA-KA4菌株的無菌發(fā)酵液相對抑菌活性最低仍可達(dá)到55.50%，說明BA-KA4菌株胞外抑菌物質(zhì)具有良好的溫度、pH穩(wěn)定性
。
（4）請你談一談與化學(xué)防治相比，生物防治的優(yōu)勢是
降低環(huán)境污染；減少化學(xué)藥劑在果實(shí)中的殘留；對其他生物干擾??；污染小，安全性高；作用持久；減小病菌抗藥性等
降低環(huán)境污染；減少化學(xué)藥劑在果實(shí)中的殘留；對其他生物干擾小；污染小，安全性高；作用持久；減小病菌抗藥性等
（至少說兩點(diǎn)）。
