對土壤中分解纖維素的微生物的研究與應(yīng)用,使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精,用纖維素酶處理服裝面料等。為了尋求高效降解纖維素的微生物,某科研團(tuán)隊(duì)進(jìn)行了纖維素優(yōu)勢分解菌的篩選實(shí)驗(yàn)。主要步驟如下:
①制備培養(yǎng)基。
②纖維素分解菌的分離、純化。取富集培養(yǎng)后的土樣培養(yǎng)液,經(jīng)適當(dāng)稀釋后,移取培養(yǎng)液各0.1mL分別接種到能分別篩選出細(xì)菌、真菌和放線菌的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行分離、純化培養(yǎng)。
③纖維素分解菌的初篩。將已經(jīng)純化的菌株接種到同一個(gè)以纖維素為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,使用剛果紅染色法,根據(jù)培養(yǎng)基平板上透明圈直徑(H)與菌落直徑(h)比值的大小,初步篩選出纖維素優(yōu)勢分解菌。
回答下列問題:
(1)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物時(shí),獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是
防止外來雜菌的污染
防止外來雜菌的污染
。
(2)微生物的接種方法很多,最常用的是平板劃線法和 稀釋涂布平板法
稀釋涂布平板法
。步驟甲和步驟乙是平板劃線操作中的兩個(gè)步驟,步驟甲的操作是將接種環(huán)放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)燒紅;步驟乙的操作是將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中,沾取一環(huán)菌液,從步驟甲至步驟乙的操作過程中,還需進(jìn)行的操作步驟是 在火焰旁冷卻接種環(huán),并打開盛有菌液的試管的棉塞;將試管口通過火焰
在火焰旁冷卻接種環(huán),并打開盛有菌液的試管的棉塞;將試管口通過火焰
。
(3)微生物吸收的無機(jī)鹽的作用是 維持細(xì)胞和生物體的生命活動(dòng);維持細(xì)胞的酸堿平衡(調(diào)節(jié)滲透壓;組成化合物)
維持細(xì)胞和生物體的生命活動(dòng);維持細(xì)胞的酸堿平衡(調(diào)節(jié)滲透壓;組成化合物)
。(答出二點(diǎn)即可)。
(4)步驟②③中,若將稀釋后且富含多種類型微生物的土樣培養(yǎng)液直接涂布于同一個(gè)以纖維素為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,可能導(dǎo)致錯(cuò)過優(yōu)勢纖維素分解菌的發(fā)現(xiàn),原因是 不同種類型的微生物之間的生長會相互影響(或多種類型微生物直接接種在同一個(gè)以纖維素為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,各種微生物之間產(chǎn)生競爭關(guān)系,生長相互影響,不利于優(yōu)勢纖維素分解菌的發(fā)現(xiàn))
不同種類型的微生物之間的生長會相互影響(或多種類型微生物直接接種在同一個(gè)以纖維素為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,各種微生物之間產(chǎn)生競爭關(guān)系,生長相互影響,不利于優(yōu)勢纖維素分解菌的發(fā)現(xiàn))
。
(5)接種在培養(yǎng)基上初篩分離得到的4個(gè)菌株的觀察結(jié)果如表。表中H/h的大小與纖維素酶的 量與活性
量與活性
有關(guān)。據(jù)表分析,降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是 3
3
(填表中菌株編號的序號)。
菌株編號 |
菌落直徑h(cm) |
透明圈直徑H(cm) |
H/h |
1 |
0.3 |
0.9 |
3.00 |
2 |
0.3 |
0.6 |
2.00 |
3 |
0.3 |
1.3 |
4.33 |
4 |
0.6 |
2.0 |
3.33 |