含有pRiA4質(zhì)粒的發(fā)根農(nóng)桿菌能誘導(dǎo)植物體長出發(fā)根，特別適合規(guī)?；a(chǎn)從根中提取的物質(zhì)如丹參酮，為了探究MYB98基因（丹參酮合成調(diào)控基因）對產(chǎn)量的影響，研究人員進(jìn)行了如下操作：

（1）如圖所示的“重組”步驟中，目的基因應(yīng)選擇

D

D

。
A.丹參酮合成基因
B.鏈霉素抗性基因
C.潮霉素抗性基因
D.MYB98基因
（2）要確定圖中的“導(dǎo)入”是否成功，

培養(yǎng)一段時(shí)間后

培養(yǎng)一段時(shí)間后

（“立即”或“培養(yǎng)一段時(shí)間后”）將含發(fā)根農(nóng)桿菌的菌液

稀釋

稀釋

，再接種于添加了

潮霉素

潮霉素

的固體培養(yǎng)基上，也可借助

核酸分子雜交

核酸分子雜交

技術(shù)進(jìn)行檢測，后者還可檢測目的基因是否在發(fā)根農(nóng)桿菌中完成轉(zhuǎn)錄。
（3）在“感染”步驟中，含有目的基因的發(fā)根農(nóng)桿菌侵染經(jīng)

消毒

消毒

處理的丹參葉片細(xì)胞，目的基因整合到葉片細(xì)胞的

染色體DNA（基因組）

染色體DNA（基因組）

中。之后對丹參葉片進(jìn)行

脫菌/除菌/除去農(nóng)桿菌

脫菌/除菌/除去農(nóng)桿菌

處理，以利于葉片組織的存活。
（4）圖中的目的基因在丹參的

根

根

細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，該轉(zhuǎn)基因即獲得了成功。若要分離的基因表達(dá)產(chǎn)物可用

電泳

電泳

法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的電荷、

大小

大小

及形狀不同，在電場中的

移動速率

移動速率

不同而實(shí)現(xiàn)分離。丹參酮具有抑菌消炎等功能，其作為丹參的

次級代謝（或次生代謝）產(chǎn)物

次級代謝（或次生代謝）產(chǎn)物

，并非丹參生命活動必需的物質(zhì)。
（5）取丹參植株葉片組織，用酶解法得到大量單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，該過程

需要

需要

（“需要”或“不需要”或“不確定”）經(jīng)歷愈傷組織階段，得到的成活后代中，有一些植株莖稈特別粗壯，科研人員認(rèn)為其很可能是多倍體，可通過

分析染色體組型（分析染色體數(shù)目）

分析染色體組型（分析染色體數(shù)目）

進(jìn)行確定。