乳酸菌在生產(chǎn)生活中有廣泛的應(yīng)用，如泡菜、酸奶、酸筍等食品生產(chǎn)上。乳酸菌在細(xì)胞代謝過程中會(huì)分泌細(xì)菌素、有機(jī)酸等物質(zhì)，細(xì)菌素對多種食品中常見的致病菌具有廣譜抑菌活性。實(shí)驗(yàn)小組為了檢測細(xì)菌素的抗菌活性，將富集培養(yǎng)后的乳酸菌菌株分離純化，并接種到MRS液體培養(yǎng)基中。請回答以下問題：
（1）利用平板劃線法純化乳酸菌時(shí)，所用的接種工具是

接種環(huán)/接種針

接種環(huán)/接種針

，接種前先用

無菌水

無菌水

對乳酸菌菌液進(jìn)行一定濃度的稀釋，第二次及其以后的劃線都要從上一次劃線的

末端

末端

開始，目的是

使細(xì)菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，便于獲得單菌落

使細(xì)菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，便于獲得單菌落

。
（2）在泡菜腌制時(shí)，用白酒擦拭泡菜壇的目的是

消毒（抑制雜菌）

消毒（抑制雜菌）

，若泡菜壇有砂眼，常導(dǎo)致腌制的泡菜臭而不酸，其原因是

有氧條件下，乳酸菌不發(fā)酵，而其它雜菌繁殖后導(dǎo)致蔬菜腐敗變臭

有氧條件下，乳酸菌不發(fā)酵，而其它雜菌繁殖后導(dǎo)致蔬菜腐敗變臭

。
（3）用打孔法測定乳酸菌分泌的細(xì)菌素對指示菌的抑菌效果時(shí)，應(yīng)該先吸取稀釋的

指示菌

指示菌

菌液涂布到平板中，再使用5mm直徑的打孔器打孔，每孔分別注入離心后的50μLMRS液體培養(yǎng)基的

上清液

上清液

（填“上清液”或“沉淀物”）。培養(yǎng)24h后測定抑菌圈的直徑，當(dāng)抑菌圈的直徑至少大于

5

5

mm才能判斷為具有抑菌活性。
（4）實(shí)驗(yàn)小組用經(jīng)乳酸調(diào)節(jié)pH至3.5（與發(fā)酵48h后發(fā)酵液的pH相同）的MRS液體培養(yǎng)基作為空白對照組，觀察其抑菌情況。設(shè)置該組實(shí)驗(yàn)的目的是

排除有機(jī)酸對細(xì)菌的抑制作用

排除有機(jī)酸對細(xì)菌的抑制作用

。
（5）竹類除了可制作酸筍外，具有很好的觀賞、經(jīng)濟(jì)和生態(tài)價(jià)值，某研究小組欲提取海濱植物紅樹細(xì)胞中的耐鹽堿基因M，將其轉(zhuǎn)入竹子細(xì)胞中，以獲得高產(chǎn)耐鹽堿品種。提取紅樹的總RNA后，經(jīng)

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

獲得cDNA后，可用PCR技術(shù)擴(kuò)增。在PCR擴(kuò)增過程中，引物在

退火/復(fù)性

退火/復(fù)性

階段與模板結(jié)合后，TaqDNA聚合酶在適宜溫度（約72℃）下，將核苷酸連接到2個(gè)引物的

3’

3’

端（填3′或5′）
（6）轉(zhuǎn)入重組DNA分子的竹子愈傷組織經(jīng)

再分化

再分化

可形成胚狀體或芽。胚狀體能長出

根和芽

根和芽

，直接發(fā)育形成再生植株。