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鎳是一種重金屬,由于在工業(yè)上被大量使用及廢料的大量排放而對(duì)環(huán)境產(chǎn)生了嚴(yán)重的污染??蒲腥藛T發(fā)現(xiàn)重組質(zhì)粒pSUNI含有nixA基因,該基因編碼一種高特異性的N+轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,重組質(zhì)粒pGPMT3帶有編碼金屬硫蛋白基因(tmG),金屬硫蛋白(TM)可高容量地結(jié)合重金屬離子,又可在細(xì)胞內(nèi)消除重金屬離子對(duì)細(xì)胞本身的毒害作用。科學(xué)家利用基因工程培育出能夠富集Ni2+的“超級(jí)細(xì)菌”一大腸桿菌JM1O9,用來(lái)凈化工業(yè)廢水,治理環(huán)境污染?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)構(gòu)建重組質(zhì)粒pSUNI、pGPMT3所需要的兩種酶是
限制酶、DNA連接酶
限制酶、DNA連接酶
,培育“超級(jí)細(xì)菌”——大腸桿菌JM109所需的目的基因是
nixA、tmG
nixA、tmG

(2)科研人員用
Ca2+
Ca2+
處理大腸桿菌,使細(xì)胞處于一種能吸收周?chē)h(huán)境DNA的生理狀態(tài),再將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞。在大腸桿菌JM109細(xì)胞內(nèi),nixA基因表達(dá)產(chǎn)物分布在大腸桿菌的
細(xì)胞膜
細(xì)胞膜
。
(3)科研人員為檢測(cè)大腸桿菌JM109富集Ni2+的效果,在適宜的條件下培養(yǎng)原JM109、JM1O9+pSUNI,JM109+PSUNI+pGPMT3,在含有一定濃度Ni2+的培養(yǎng)液中培養(yǎng),檢測(cè)大腸桿菌菌體的數(shù)量和菌體中Ni2+的含量,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。
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該實(shí)驗(yàn)原JM109組的作用是
對(duì)照
對(duì)照
,JM1O9+pSUNI組的大腸桿菌數(shù)量最少的原因是
特異性的Ni2+轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將較多Ni2+轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞,且沒(méi)有金屬硫蛋白(TM)消除Ni2+對(duì)自身細(xì)胞的毒害作用
特異性的Ni2+轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將較多Ni2+轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞,且沒(méi)有金屬硫蛋白(TM)消除Ni2+對(duì)自身細(xì)胞的毒害作用

(4)簡(jiǎn)要寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路,探究大腸桿菌JM109富集Ni2+受廢水pH的影響。實(shí)驗(yàn)思路:
配制一系列含Ni2+的不同pH培養(yǎng)液培養(yǎng)大腸桿菌JM109,一段時(shí)間后檢測(cè)各組培養(yǎng)液中Ni2+含量的變化
配制一系列含Ni2+的不同pH培養(yǎng)液培養(yǎng)大腸桿菌JM109,一段時(shí)間后檢測(cè)各組培養(yǎng)液中Ni2+含量的變化
。

【答案】限制酶、DNA連接酶;nixA、tmG;Ca2+;細(xì)胞膜;對(duì)照;特異性的Ni2+轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將較多Ni2+轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞,且沒(méi)有金屬硫蛋白(TM)消除Ni2+對(duì)自身細(xì)胞的毒害作用;配制一系列含Ni2+的不同pH培養(yǎng)液培養(yǎng)大腸桿菌JM109,一段時(shí)間后檢測(cè)各組培養(yǎng)液中Ni2+含量的變化
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:11引用:2難度:0.5
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  • 1.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 2.經(jīng)由食物攝取過(guò)量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過(guò)敏等不良反應(yīng),嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命,因此必須對(duì)食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來(lái)源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)模化生產(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國(guó)科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
    (1)通過(guò)上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫(xiě)下列編號(hào))。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?;a(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    (2)在PCR過(guò)程中,引物的功能是
     
    。
    A.啟動(dòng)DNA復(fù)制
    B.規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當(dāng)復(fù)制模板
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    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     

    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中,溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開(kāi)后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開(kāi),才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實(shí)驗(yàn)操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿(mǎn)載”的是
     
    。
    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X(jué)-gal試劑,以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長(zhǎng)與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
  • 3.用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒,可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個(gè)堿基對(duì))的長(zhǎng)鏈,而同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒,可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段,見(jiàn)圖(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個(gè)黏性末端)。
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    若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒,則產(chǎn)生的DNA片段的長(zhǎng)度為( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
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