新型冠狀病毒肺炎是由一種新型冠狀病本（SARS-CoV-2，簡(jiǎn)稱新冠病毒）引起的。根據(jù)相關(guān)材料回答下列問(wèn)題：

材料一：由于疫情發(fā)展迅速，新冠病毒核酸檢測(cè)可以快速有效地對(duì)病人及疑似患者的診斷提供直接證據(jù)。新冠病毒核酸檢測(cè)采用熒光定量PCR儀，通過(guò)檢測(cè)熒光信號(hào)的累積（以Ct值表示），來(lái)確定樣本中是否有病毒核酸。新冠病毒的遺傳物質(zhì)為RNA，科學(xué)家先將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄，再將得到的cDNA進(jìn)行擴(kuò)增得到了大量DNA片段。
（1）過(guò)程①中，需要使用

逆轉(zhuǎn)錄酶

逆轉(zhuǎn)錄酶

酶。
（2）過(guò)程③中，需要設(shè)計(jì)

2

2

種引物，且設(shè)計(jì)時(shí)要避免引物之間

堿基互補(bǔ)配對(duì)

堿基互補(bǔ)配對(duì)

，否則會(huì)造成引物自連。
（3）采集新冠肺炎疑似患者的咽部細(xì)胞樣本提取核酸進(jìn)行上述過(guò)程，若經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得了1個(gè)cDNA，則在過(guò)程③中經(jīng)10次循環(huán)后，得到的DNA數(shù)量為

2¹⁰

2¹⁰

個(gè)。每一個(gè)擴(kuò)增出來(lái)的DNA序列，都可與預(yù)先加入的一段熒光標(biāo)記探針結(jié)合，產(chǎn)生熒光信號(hào)，擴(kuò)增出來(lái)的靶基因越多，觀察到的Ct值就越

大

大

（填“大”或“小”）。
材料二：應(yīng)對(duì)不斷蔓延的新冠肺炎，目前最好的方式仍然是接種疫苗。新冠病毒表面布滿像皇冠一樣的刺突蛋白（由S基因控制合成）。針對(duì)新冠病毒的疫苗可以通過(guò)模仿這些刺突蛋白，從而觸發(fā)人體免疫系統(tǒng)的響應(yīng)。如圖2表示疫苗的制作原理：

（4）如果利用基因工程研制新冠病毒疫苗，應(yīng)選擇

基因S

基因S

作為目的基因，以便用于后續(xù)操作。過(guò)程②表示構(gòu)建

基因表達(dá)載體

基因表達(dá)載體

，其組成除了目的基因外，還必須有

標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子（復(fù)制原點(diǎn)）

標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子（復(fù)制原點(diǎn)）

。過(guò)程③需要用

CaCl₂（Ca²⁺）

CaCl₂（Ca²⁺）

處理細(xì)胞。